新規ナトリウム利尿ペプチド受容体/グアニルシクラーゼA選択的アゴニストは、ヒト糸球体黄体細胞株におけるアンジオテンシンIIおよびフォルスコリン誘発アルドステロン合成を阻害する

Novel natriuretic peptide receptor/guanylyl cyclase A-selective agonist inhibits angiotensin II- and forskolin-evoked aldosterone synthesis in a human zona glomerulosa cell line.

• L J Olson
• D G Lowe
• J G Drewett

抄録

我々は、新規なヒトナトリウム利尿ペプチド受容体/グアニルシクラーゼA (hNPR-A)選択的アゴニストANP [G9T, R11S, G16R] (sANP)の産生を報告する。このアゴニストは、hNPR-Aに対してANPと同様の親和性を有し、ヒトのナトリウレチン性ペプチドクリアランス受容体（hNPR-C）に対しては1,000〜10,000倍に減少した親和性を有する。ヒトA型ナトリウム利尿ペプチドとsANP（10(-11)から10(-6)M）は、濃度依存的にcGMPレベルを増加させ、フォルスコリン（100nM）およびアンジオテンシンII（5nM）誘発アルドステロンおよびプレグネノロン産生を減少させる結果となった。これらの結果は、コレステロールからプレグネノロンへのアゴニスト刺激された変換（すなわち、チトクロームP-450コレステロールモノオキシゲナーゼ側鎖切断酵素、EC 1.14.15.6）に対する両ペプチドの阻害効果を明らかにした。H295R細胞はまた、[3H]コルチコステロンから[3H]アルドステロンへのアンギオテンシンIIおよびフォルスコリン誘発変換を示した（すなわち、チトクロームP-450ステロイド11β-モノオキシゲナーゼ/アルドステロン合成酵素、EC 1.14.15.4）。ヒトA型ナトリウム利尿ペプチドおよびsANP（10(-7) M）は、アンジオテンシンII刺激後期経路を阻害したが、コルチコステロンからアルドステロンへのフォルスコリン促進変換には影響を与えなかった。これらの結果は、hNPR-Aを介したシグナル伝達が、使用するステロイド原性アゴニストに依存して、チトクロームP-450コレステロールモノオキシゲナーゼ側鎖切断酵素およびステロイド11β-モノオキシゲナーゼ/アルドステロン合成酵素複合体を阻害することを直接的に示している。

We report the production of a novel human natriuretic peptide receptor/guanylyl cyclase A (hNPR-A)-selective agonist ANP [G9T, R11S, G16R] (sANP). This agonist has similar affinity to ANP for hNPR-A and 1,000-10,000-fold reduced affinity for the human natriuretic peptide clearance receptor (hNPR-C). sANP was used to directly test the hypothesis that hNPR-A mediates the inhibitory effect of natriuretic peptides on aldosterone generation in a human zona glomerulosa cell line, H295R. Human type A natriuretic peptide and sANP (10(-11) to 10(-6) M) resulted in concentration-dependent increases in cGMP levels and decreases in forskolin (100 nM)- and angiotensin II (5 nM)-induced aldosterone and pregnenolone production. These results revealed an inhibitory effect of both peptides on the agonist-stimulated conversion of cholesterol to pregnenolone (i.e., cytochrome P-450 cholesterol monooxygenase side-chain cleaving enzyme, EC 1.14.15.6). H295R cells also exhibited angiotensin II- and forskolin-evoked conversion of [3H]cortico-sterone to [3H]aldosterone (i.e., cytochrome P-450 steroid 11 beta-monooxygenase/aldosterone synthase, EC 1.14.15.4). Human type A natriuretic peptide and sANP (10(-7) M) inhibited the angiotensin II-stimulated late pathway but did not affect forskolin-facilitated conversion of corticosterone to aldosterone. Our results directly demonstrate inhibitory effects of hNPR-A-mediated signal transduction on cytochrome P-450 cholesterol monooxygenase side-chain cleaving enzyme and steroid 11 beta-monooxygenase/aldosterone synthase complex depending on the steroidogenic agonist used.