A型ボツリヌス毒素単回注射後のラット咬筋の組織形態学的変化

Histomorphometric Changes of the Masseter Muscle of Rats After a Single Injection of Botulinum Toxin Type A.

抄録

背景:

A型ボツリヌス毒素（BoNT-A）が咀嚼筋に構造的変化をもたらすことが報告されている。しかし、BoNT-Aパラメータによって影響を受けるすべての組織形態学的パラメータが評価されているわけではない。本研究では、BoNT-A単回注射後のラットの咬筋における組織形態学的変化について検討した。

BACKGROUND: It has been reported that botulinum toxin type A (BoNT-A) produces structural changes in masticatory muscles. However, not all histomorphometric parameters affected by BoNT-A parameters have been assessed. This study investigated the histomorphometric changes in the masseter muscle of rats after a single injection of BoNT-A.

方法:

成体44匹を無作為にコントロール群（n=22）とBoNT-A群（n=22）に分けた。対照群には0.14mL/kgの生理食塩水を咬筋に単回投与し、BoNT-A群には7U/KgのBoNT-Aを投与した。各群は同量の注射物質を投与した。処置後7日目（n=5）、14日目（n=5）、21日目（n=5）、28日目（n=4）、90日目（n=3）に動物を犠牲にした。ヘマトキシリン-エオシン処理から組織学的咬筋組織スライドを得、光学顕微鏡で筋断面積、結合組織の量、筋細胞の量と直径について分析した。統計解析には、データの比較に一般化線形モデルを用いた（ANOVA）。すべての検定において、有意水準は5％とした。

METHODS: Forty-four adult animals were randomly divided into control group (n = 22) and BoNT-A group (n = 22). Controls received a single dose of 0.14 mL/kg of saline in masseter muscles, and the BoNT-A group received a 7 U/Kg of BoNT-A. The groups received the same volume of injected substances. Animals were sacrificed on 7th (n = 5), 14th (n = 5), 21st (n = 5), 28th (n = 4) and 90th (n = 3) days post-treatment. Histological masseter tissue slides were obtained from hematoxylin-eosin treatment and analyzed in optical microscopy regarding muscle cross-sectional area, amount of connective tissue and quantity and diameter of myocytes. For statistical analysis, generalized linear models were used to compare the data (ANOVA). In all test, the significance level of 5% was set.

結果:

咬筋の断面積のBoNT-A値は、研究を通してコントロールより有意に低かった（p<0.01）。筋細胞量に関しては、BoNT-Aサブグループは14日目以降、試験終了までコントロールより高い値を示した（p<0.0001）が、筋細胞の直径はすべての評価時点ですべてのBoNT-Aサブグループで小さかった（p<0.0001）。結合組織の量は、試験期間を通してBoNT-Aサブグループで多かった（p<0.0001）。

RESULTS: BoNT-A values of cross-sectional area of the masseter muscle were significantly lower than controls (p < 0.01) throughout the study. Regarding myocytes quantity, BoNT-A subgroups presented higher values than controls (p < 0.0001) since the 14th day until the end of the study; however, the diameter of myocytes was smaller in all BoNT-A subgroups (p < 0.0001) in all assessment points. The amount of connective tissue was higher in BoNT-A subgroups (p < 0.0001) throughout the study.

結論:

BoNT-Aの単回注射は、組織形態学的パラメータに関して、ラットの咬筋の構造を変化させた。

CONCLUSION: A single injection of BoNT-A altered the structure of masseter muscle of rats, regarding its histomorphometric parameters.

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