DiclofenacとMethylprednisoloneで処理したMC3T3-E1細胞における遺伝子発現

Gene Expression in MC3T3-E1 Cells Treated with Diclofenac and Methylprednisolone.

抄録

非ステロイド性抗炎症薬（NSAIDs）やグルココルチコイド（GC）は、関節・骨格系疾患の治療にしばしば使用されます。NSAIDsやGCの長期使用は、骨代謝に悪影響を及ぼし、骨質を低下させ、骨折治癒を阻害する。本研究では、マウス前骨芽細胞MC3T3-E1を用いて、ジクロフェナク（DF）とメチルプレドニゾロン（MP）の細胞増殖と遺伝子発現への影響を実証した。細胞は、0.5 µM、5 µM、50 µMの3種類の用量のDFまたはMPとともにインキュベートされた。MPは24時間後でも細胞生存率を低下させたが、DFはわずか7日間の処理で細胞生存率を阻害した。処理1、2、3、7日後に細胞を溶解し、遺伝子発現を逆転写・定量PCR（RT-qPCR）アッセイで解析した。DFは、骨形成マーカー遺伝子の発現に有意な影響を与えなかった。MPは、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 の発現を変化させた。MPは、DFよりも強力にマウスのプレ骨芽細胞の分化と生存を阻害すると結論付けた。この結果は、DFを長期間投与しても、MPを投与するよりも骨芽細胞への悪影響が少ないことを示唆している。

Nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) and glucocorticoids (GCs) are often used to treat articular-skeletal disorders. The extended use of NSAIDs and GCs have adverse effects on bone metabolism, reducing bone quality and impairing fracture healing. In the present study, we used mouse pre-osteoblast cells MC3T3-E1 to demonstrate the effects of diclofenac (DF) and methylprednisolone (MP) on cell proliferation and gene expression. Cells were incubated with three doses of DF or MP: 0.5 µM, 5 µM, and 50 µM. MP decreased cell viability even after 24 h, but DF inhibited cell viability after only seven days of treatment. The cells were lysed after one, two, three, and seven days of treatment, and gene expression was analyzed by reverse transcription and quantitative PCR (RT-qPCR) assays. DF did not significantly affect the expression of the osteogenic marker genes. MP modified the expression of , , and . We concluded that MP is a more potent inhibitor of mouse pre-osteoblast differentiation and viability than is DF. Our results suggest that prolonged DF treatment could be less harmful to osteoblasts than MP treatment.