歯科用ユニット水試料中の病原性自由生活アメーバの分離と同定

Isolation and identification of potentially pathogenic free-living amoeba in dental-unit water samples.

抄録

様々な水源における自由生活アメーバ（FLA）の存在は報告されているが、医療施設および歯科医療施設の水試料におけるその存在量に関する調査はほとんど行われていない。本研究では、イランの歯科用ユニット水サンプル中のFLA分離株の形態学的および分子学的特徴を明らかにすることを目的とした。17の歯科診療室から合計232の水試料を採取した。その後、非栄養寒天培地（NNA）上でろ過および培養を行った。また、陽性検体について、属・種特異的プライマーと共通プライマーセットを用いてポリメラーゼ連鎖反応（PCR）アッセイと塩基配列決定を行った。顕微鏡法では166検体がFLA陽性であったが、共通プライマーセットを用いた分子法では114検体が陽性であった。属・種特異的プライマーを用いたPCR法では、23.27％（54/232検体）がアカントアメーバ属（T4遺伝子型）、36.63％（85/232検体）がVermamoeba vermiformis、1.72％（4/232検体）がVahlkampfiidae科（Naegleria lovaniensis）と同定された。これらの結果から、歯科用ユニットの濾過システムを改善し、歯科用ユニット水中のFLAを定期的にスクリーニングする必要性が強調された。

Although the presence of free-living amoebae (FLAs) in various water sources has been reported, few studies have been surveyed on their abundance in medical-unit and dental-unit water samples. The current study aimed to identify morphological and molecular characteristics of FLA isolates in the water samples of the dental unit in Iran. A total of 232 water samples were collected from 17 dental units. Then, filtration and cultivation were conducted on a non-nutrient agar (NNA) medium. Also, polymerase chain reaction (PCR) assay and sequencing were performed by using the genus/species-specific primers plus a common primer set on positive samples. One hundred and sixty-six samples were positive for FLA by the microscopic method, whereas 114 samples were positive by the molecular method with a common primer set. Considering the PCR assay with genus/species-specific primers, 23.27% (54/232) samples were identified as Acanthamoeba spp. (belonging to T4 genotype), 36.63% (85/232) as Vermamoeba vermiformis, and 1.72% (4/232) as Vahlkampfiidae family (Naegleria lovaniensis). These results highlight a need to improve filtration systems in dental units and periodic screenings for FLA in dental-unit water.