マウス臼歯部における口腔内細菌叢曝露歯髄の3種抗生物質ペーストおよび水酸化カルシウムセメントによるキャッピングに対する反応性．

Responses of oral-microflora-exposed dental pulp to capping with a triple antibiotic paste or calcium hydroxide cement in mouse molars.

抄録

はじめに:

シプロフロキサシン，メトロニダゾール，ミノサイクリンをマクロゴールとプロピレングリコールで軟膏化したトリプルアンチオティックペースト（TAP）に対する口腔内細菌叢曝露歯髄の反応は，細胞レベルではまだ十分に解明されていない．本研究では、マウス臼歯部において、TAPを用いたキャッピングに対する口腔内細菌叢曝露歯髄の反応を明らかにすることを目的とした。

INTRODUCTION: Responses of oral-microflora-exposed dental pulp to a triple antibiotic paste (TAP), a mixture of ciprofloxacin, metronidazole, and minocycline in ointment with macrogol and propylene glycol, remain to be fully clarified at the cellular level. This study aimed to elucidate responses of oral-microflora-exposed dental pulp to capping with TAP in mouse molars.

研究方法:

6週齢のマウスの第一大臼歯に空洞を作り、24時間歯髄を露出させた。マクロゴール（M）とプロピレングリコール（P）の組み合わせ（MP、対照群）に加え、TAP（TAP群）または水酸化カルシウムセメント（CH群）で露出した歯髄をキャップし、その後グラスアイオノマーセメントで充填した。1週間、2週間、3週間の間隔でサンプルを採取し、定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（qRT-PCR）分析に加えて、ネスチンおよびKi-67の免疫組織化学とデオキシウレイド-5'-三リン酸ビオチンニックエンドラベル（TUNEL）アッセイを実施した。

METHODS: A cavity was prepared on the first molars of 6-week-old mice to expose the dental pulp for 24 h. The exposed pulp was capped with TAP (TAP group) or calcium hydroxide cement (CH group), in addition to the combination of macrogol (M) and propylene glycol (P) (MP, control group), followed by a glass ionomer cement filling. The samples were collected at intervals of 1, 2, and 3 weeks, and immunohistochemistry for nestin and Ki-67 and deoxyuride-5'-triphosphate biotin nick end labeling (TUNEL) assay were performed in addition to quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) analyses.

結果:

2週目、3週目の歯髄壊死は、コントロール群、CH群の順で発生率が高かったが、歯髄の治癒部位は各時点でTAP群で最も発生率が高かった。TAP群の歯髄では、2週目に初めて3次象牙質の形成が観察された。qRT-PCR解析により、TAPは1週目、2週目にそれぞれ幹細胞、樹状細胞を活性化することが明らかになった。

RESULTS: The highest occurrence rate of pulp necrosis was found in the control group followed by the CH group at Weeks 2 and 3, whereas the highest occurrence rate of healed areas in the dental pulp was observed in the TAP group at each time point. Tertiary dentin formation was first observed in the dental pulp of the TAP group at Week 2. In contrast, bone-like and/or fibrous tissues were frequently observed in the CH group. qRT-PCR analyses clarified that TAP activated the stem and dendritic cells at Weeks 1 and 2, respectively.

結論:

TAPを歯髄キャップ剤として使用することで、マウス臼歯部の口腔内細菌叢に曝された歯髄の治癒プロセスが改善されることがわかった。

CONCLUSIONS: The use of TAP as a pulp-capping agent improved the healing process of oral-microflora-exposed dental pulp in mouse molars.