デコキネートナノリポソームの最適条件とブロイラーにおけるジクラズリル耐性Eimeria tenella感染症に対する抗菌効果の評価

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Vet. Parasitol..2020 Jul;283:109186. S0304-4017(20)30166-7. doi: 10.1016/j.vetpar.2020.109186.Epub 2020-07-16.

デコキネートナノリポソームの最適条件とブロイラーにおけるジクラズリル耐性Eimeria tenella感染症に対する抗菌効果の評価

Evaluation of optimum conditions for decoquinate nanoliposomes and their anticoccidial efficacy against diclazuril-resistant Eimeria tenella infections in broilers.

Ruonan Bo
Xingru Dai
Jie Huang
Simin Wei
Mingjiang Liu
Jingui Li

PMID: 32683214 DOI: 10.1016/j.vetpar.2020.109186.

抄録

デコキネート（DQ）は鶏の消化管内のコクシジア感染症の予防薬として使用されているが、DQは水に非常に不溶であるため、水への溶解性を向上させることが重要である。したがって、DQの水溶性を向上させることが極めて重要である。まず、薄膜分散超音波法を用いてデコキネートナノリポソーム（DQNL）を調製した。DQNLの調製条件は、直交試験を用いて最適化した。最適なDQNLの調製条件は、卵黄レシチン：薬剤（w/w）10：1、卵黄レシチン：コレステロール（w/w）5：1、回転蒸発温度50℃、超音波時間15分であった。これらの条件で調製したDQNLのカプセル化効率は99.24%に達し、薬物負荷は5.67%であった。また、最適化されたDQNLの特性評価も行った。DQNLの透過型電子顕微鏡観察の結果、リポソームの特徴的な構造を有していることがわかった。平均粒子径は115.6nmであった。多分散度指数は0.175であった。ゼータ電位は-39.1mVであった。DQNLの安定性は、4℃での保存時に高い値を示した。また，飲料水中のDQNLの低用量（5mg/L）では，ジクラズリル抵抗性Eimeria tenella株に対して飼料中のDQ40mg/kgと同様の抗菌効果が得られることが確認された。また，DQNLのEimeria tenella卵胞の胞子形成抑制効果は用量依存的であった。そのため、DQNLをナノリポソームにカプセル化することで、DQの抗コッキン剤としての効果が大幅に向上することがわかった。

Decoquinate (DQ) is used for prophylaxis against coccidian infections within the digestive tract of chickens, but DQ is extremely insoluble in water. Hence, improving the water solubility of DQ is extremely important. First, decoquinate nanoliposomes (DQNLs) were prepared by the thin-film dispersion-ultrasonic method. The preparation conditions of DQNLs were optimized using the orthogonal test. The optimal preparation conditions of DQNLs were: a ratio of egg-yolk lecithin:drug (w/w) of 10:1, ratio of egg-yolk lecithin:cholesterol (w/w) of 5:1, rotary-evaporation temperature of 50 ℃, and ultrasound duration of 15 min. The encapsulation efficiency of DQNLs prepared under these conditions reached 99.24 % and drug loading was 5.67 %. The characterization of optimized DQNLs was also done. Transmission electron microscopy of DQNLs showed that they had the characteristic structure of liposomes. The mean particle size was 115.6 nm. The polydispersity index was 0.175. The zeta potential was -39.1 mV. The stability of DQNLs was high upon storage at 4 ℃. In vivo studies demonstrated that the lower dose (5 mg/L) of DQNLs in drinking water obtained the similar anticoccidial efficacy to that of 40 mg/kg DQ in feed against diclazuril-resistance Eimeria tenella isolate. The in vitro inhibitory effect of DQNLs on the sporulation of Eimeria tenella oocysts was dose-dependent. Therefore, the anticoccidial efficacy of DQ was enhanced significantly after being encapsulated into nanoliposomes.