Circ_0081143のノックダウンは、miR-497-5p/EGFR軸を介して胃癌細胞の低酸素誘導性遊走、浸潤、EMTを緩和する

Knockdown of Circ_0081143 Mitigates Hypoxia-Induced Migration, Invasion, and EMT in Gastric Cancer Cells Through the miR-497-5p/EGFR Axis.

• Jianjun Tang
• Hongyan Zhu
• Jingjing Lin
• Hongbo Wang

抄録

胃癌は最も一般的な悪性腫瘍の一つである。サーキュラーRNA（circRNA）は、がんのパラダイムにおける新たなプレーヤーとして台頭してきている。本研究では、著者らは、低酸素下でのGC進行におけるcirc_0081143の役割とメカニズムをさらに探求することを目的とした。 circ_0081143、miR-497-5p、EGFR（上皮成長因子受容体）の発現量を定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（qRT-PCR）により検出した。細胞の遊走および浸潤能力はTranswellアッセイにより決定した。ビメンチン、N-カドヘリン、E-カドヘリンおよびEGFRのレベルはウェスタンブロットを用いて評価した。デュアルルシフェラーゼレポーターアッセイを行い、miR-497-5pとcirc_0081143またはEGFRとの間の標的相関を確認した。 これらのデータは、GC組織および細胞においてcirc_0081143の発現が増加していることを示した。circ_0081143のノックダウンにより、低酸素誘導性GC細胞の遊走、浸潤、上皮/間葉系転移（EMT）が緩和された。さらに、circ_0081143はmiR-497-5pをスポンギングすることで、miR-497-5pの発現を制御していた。circ_0081143のノックダウンによる低酸素下でのGC細胞の遊走、浸潤、EMTの緩和効果は、miR-497-5pを介して制御されていた。さらに、miR-497-5pはEGFRを直接標的としており、miR-497-5pの過剰発現はEGFRをダウンレギュレートすることで低酸素下でのGC細胞の遊走、浸潤、EMTを改善した。また、circ_0081143は、低酸素誘導GC細胞においてmiR-497-5pの競合内因性RNA（ceRNA）として作用し、EGFRの発現を調節していた。 以上の結果から、circ_0081143 のノックダウンは、低酸素誘導GC細胞におけるmiR-497-5p/EGFR軸による低酸素誘導遊走、浸潤、EMTを少なくとも部分的に改善することが示唆され、GC治療の新たな分子標的となることが示唆された。

Gastric cancer is one of the most common malignancies. Circular RNAs (circRNAs) are emerging as new players in the cancer paradigm. In the present study, the authors aimed to further explore the role and mechanism of circ_0081143 in GC progression under hypoxia. The expression levels of circ_0081143, miR-497-5p, and EGFR (epidermal growth factor receptor) were detected by quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR). Cell migration and invasion abilities were determined by Transwell assay. The levels of vimentin, N-cadherin, E-cadherin, and EGFR were evaluated using Western blot. Dual-luciferase reporter assay was performed to confirm the targeted correlation between miR-497-5p and circ_0081143 or EGFR. These data indicated that circ_0081143 expression was increased in GC tissues and cells. The knockdown of circ_0081143 relieved hypoxia-induced GC cell migration, invasion, and epithelial/mesenchymal transition (EMT). Moreover, circ_0081143 regulated the abundance of miR-497-5p through sponging miR-497-5p. The alleviative effects of circ_0081143 knockdown on GC cell migration, invasion, and EMT under hypoxia were mediated by miR-497-5p. Furthermore, miR-497-5p directly targeted EGFR, and miR-497-5p overexpression ameliorated hypoxia-induced GC cell migration, invasion, and EMT by downregulating EGFR. In addition, circ_0081143 modulated EGFR expression via acting as a competing endogenous RNA (ceRNA) of miR-497-5p in hypoxia-induced GC cells. The present work suggested that circ_0081143 knockdown ameliorated hypoxia-induced migration, invasion, and EMT in GC cells at least partly by the miR-497-5p/EGFR axis, illuminating a novel molecular target for GC treatment.