マイクロRNA-495は、β-カテニン経路を阻害することにより、関節リウマチ線維芽細胞様滑膜細胞の増殖と炎症反応を抑制する

MicroRNA-495 attenuates proliferation and inflammatory response in rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes through attenuating β-catenin pathway.

• L Fang
• X F Xu
• Y Lu
• Y Y Wu
• J J Li

抄録

線維芽細胞様滑膜細胞（FLS）は、関節リウマチ（RA）の発生と進行に重要な効果を発揮します。microRNA-495 (miR-495)は、様々な細胞タイプにおける多くの成長行動を制御することができます。しかしながら、RA-FLSにおけるmiR-495の役割は未だ明らかになっていない。我々は、RAにおけるmiR-495の役割と分子機構の解明を目指した。本研究では、正常例とRA例のFLSと滑膜組織を用いた。miR-495の発現を調べるためにRT-PCR解析を行った。ウェスタンブロットアッセイは、マトリックスメタロプロテアーゼ-９（ＭＭＰ-９）、マトリックスメタロプロテアーゼ-２（ＭＭＰ-２）およびβ-カテニンのレベルを決定するために行われた。また、異なる治療群におけるRA-FLSの増殖を決定するために、セルカウンティングキット-8（CCK-8）アッセイを実施した。その結果、miR-495はRA-synovial tissueとRA-FLSの両方でダウンレギュレートされていることが示された。miR-495の過剰発現は、RA-FLSの増殖を抑制し、インターロイキン(IL)-6、IL-11、腫瘍壊死因子α(TNF-α)の炎症因子を抑制し、MMP-9、MMP-2のタンパク質発現を低下させる可能性があった。また、miR-495はRA-FLSにおいてβ-カテニンの発現を負に制御していた。また、RA-FLSにおけるmiR-495の抑制的役割は、β-カテニンの発現制御によるものであることを確認した。以上のことから、RA-FLSとRA滑膜組織ではmiR-495がダウンレギュレーションされており、miR-495はβ-カテニン発現の調節を介してRA-FLSの増殖と炎症反応を部分的に抑制していることが明らかになった。miR-495/β-カテニン経路は、RAの新たな治療標的となる可能性がある。

Fibroblast-like synoviocytes (FLSs) exert a critical effect in the occurrence and progress of rheumatoid arthritis (RA). MicroRNA-495 (miR-495) can regulate many growth behaviors in various cell types. Nevertheless, the role of miR-495 is still unclear in RA-FLS. We aimed to explore the role and molecular mechanism of miR-495 in RA. The FLSs and synovial tissue from normal and RA cases were used in the study. RT-PCR analysis was used to examine the expression of miR-495. Western blot assay was conducted to determine the levels of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9), matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) and β-catenin. Cell counting kit-8 (CCK-8) assays were performed to determine the proliferation of RA-FLS in different treatment groups. The results showed that miR-495 is down-regulated in both RA-synovial tissue and RA-FLSs. Overexpression of miR-495 could inhibit RA-FLS proliferation and inflammatory factors of interleukin (IL)-6, IL-11 and tumor necrosis factor alpha (TNF-α), and decrease the protein expression of MMP-9 and MMP-2. In addition, miR-495 could negatively regulate the expression of β-catenin in RA-FLSs. We also confirmed that the inhibitory role of miR-495 in RA-FLS is through the regulation of β-catenin expression. Taken together, miR-495 is downregulated in RA-FLS and RA synovial tissue, and miR-495 inhibits proliferation and inflammatory response in RA-FLS, partially via regulating β-catenin expression. The miR-495/β-catenin pathway may serve as a new therapeutic target for RA.

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