ラットの四肢虚血再灌流によって誘発される肺損傷に対するシクロスポリンAの前処理とエトミデートの後処理の組み合わせの効果

Effects of cyclosporin A pre-treatment combined with etomidate post-treatment on lung injury induced by limb ischemia-reperfusion in rats.

• Haibo Zou
• Xiaofeng Sun

抄録

目的:

ラットにおける四肢虚血再灌流（I/R）による肺損傷に対するシクロスポリンA（CsA）前処理およびエトミデート（ETO）後処理の影響を検討する。

OBJECTIVES: To investigate the influence of cyclosporin A (CsA) pre-treatment and etomidate (ETO) post-treatment on lung injury induced by limb ischemia-reperfusion (I/R) in rats.

方法:

ラットを、シャム、Ｉ／Ｒ、Ｉ／Ｒ＋ＣｓＡ、Ｉ／Ｒ＋ＥＴＯ、およびＩ／Ｒ＋ＣｓＡ＋ＥＴＯの５つのグループに無作為に分けた。手足I/R肺損傷は、大腿動脈の両側クランプを2時間行うことにより確立した。3時間の再灌流後、血液ガス分析を行った。病理学的変化を免疫組織化学を用いて評価した。アポトーシス指数（AI）および湿潤/乾燥重量比（W/D）を計算した。Fasタンパク質およびFasL mRNAのレベルを、それぞれウエスタンブロッティングおよびRT-PCRにより評価した。腫瘍壊死因子(TNF)-αおよびインターロイキン(IL)-1βはELISAにより検出した。

METHODS: Rats were randomly divided into five groups: sham, I/R, I/R+CsA, I/R+ETO, and I/R+CsA+ETO. Limb I/R lung injury was established by bilateral clamping of the femoral arteries for 2 hours. Following reperfusion for 3 hours, blood gas analysis was performed. Pathological changes were assessed using immunohistochemistry. The apoptosis index (AI) and wet/dry weight ratio (W/D) were calculated. Levels of Fas protein and FasL mRNA were assessed by western blotting and RT-PCR, respectively. Tumor necrosis factor (TNF)-α and interleukin (IL)-1β were detected by ELISA.

結果:

I/RによりPaOは減少したが、AI, W/D, Fas, FasL mRNA, TNF-α, IL-1βは増加した。免疫組織化学検査では、点状のアポトーシスと壊死が観察された。I/R群と比較して、I/R+ETO群とI/R+CsA群では、SpOの増加、AI、W/D、Fas、FasL mRNA、TNF-α、IL-1βの減少、アポトーシスおよび壊死細胞数の減少が認められた。CsA+ETOを併用することで、これらのパラメータの劇的な変化が得られました。

RESULTS: I/R resulted in decreased PaO but increased AI, W/D, Fas, FasL mRNA, TNF-α and IL-1β. Scattered punctate apoptosis and necrosis were observed by immunohistochemistry. Compared with the I/R group, the I/R+ETO and I/R+CsA groups showed increased SpO, decreased AI, W/D, Fas, FasL mRNA, TNF-α and IL-1β, and decreased numbers of apoptotic and necrotic cells. Combined treatment with CsA+ETO resulted in more dramatic changes in these parameters.

結論:

ETOの後処理とCsAの前処理は、ラットの四肢I/Rによって誘発される肺損傷を減少させた。このメカニズムは、Fas/FasLシグナル伝達の相乗的な阻害と関連している可能性がある。

CONCLUSIONS: ETO post-treatment and CsA pretreatment reduced lung injury induced by limb I/R in rats. The mechanism may be related to synergistic inhibition of Fas/FasL signaling.