マウス骨髄腫細胞株Sp2/0-Ag14におけるロタウイルスの細胞化能の評価

Assessing the oncolytic potential of rotavirus on mouse myeloma cell line Sp2/0-Ag14.

• Rafael A Guerrero
• Carlos A Guerrero
• Fanny Guzmán
• Orlando Acosta

抄録

序論:

癌は、米国における死因の第二位であり、心血管疾患に次ぐ死因となっている。しかし、現在、西ヨーロッパの12カ国では、がんが心血管疾患を抜いて主な死因となっている。がんの負担は世界中の医療システムに大きな課題を突きつけており、がんの予防、診断、治療の方法の改善が求められている。従来の手術、放射線治療、化学療法に代わる、補完的な治療法を開発する必要があります。

INTRODUCTION: Cancer is the second leading cause of death in the United States, surpassed only by cardiovascular disease. However, cancer has now overtaken cardiovascular disease as the main cause of death in 12 countries in Western Europe. The burden of cancer is posing a major challenge to health care systems worldwide and demanding improvements in methods for cancer prevention, diagnosis, and treatment. Alternative and complementary strategies for orthodox surgery, radiotherapy, and chemotherapy need to be developed.

目的:

腫瘍細胞に適応したロタウイルスのマウス骨髄腫Sp2/0-Ag14細胞への感染および溶解能力の観点から、腫瘍細胞適応ロタウイルスのオンコロイド化能を決定することを目的とした。

OBJECTIVE: To determine the oncolytic potential of tumor cell-adapted rotavirus in terms of their ability to infect and lysate murine myeloma Sp2/0-Ag14 cells.

材料および方法:

ロタウイルスWt1-5、WWM、TRUYO、ECwt-O、WTEWをSp2/0-Ag14細胞に接種し、免疫細胞化学、免疫蛍光、フローサイトメトリー、DNA断片化アッセイにより感染効果を調べた。

MATERIALS AND METHODS: We inoculated rotaviruses Wt1-5, WWM, TRUYO, ECwt-O, and WTEW in Sp2/0-Ag14 cells and we examined their infectious effects by immunocytochemistry, immunofluorescence, flow cytometry, and DNA fragmentation assays.

結果:

ロタウイルス感染には、ヒートショック蛋白質、プロテインジスルフィドイソメラーゼ（PDI）、インテグリンβ3が関与していた。 ロタウイルス単離株のすべてにおいて、ウイルス感染細胞内および培養液中にウイルス抗原の蓄積が検出された。Sp2/0-Ag14細胞におけるロタウイルス誘発細胞死メカニズムは、細胞膜透過性の変化、クロマチン凝縮、およびDNA断片化に関与しており、これらは細胞毒性およびアポトーシスに適合するものであった。

RESULTS: Rotavirus infection involved the participation of some heat shock proteins, of protein disulfide isomerase (PDI), and integrin β3. We detected the accumulation of viral antigens within the virus-inoculated cells and in the culture medium in all the rotavirus isolates examined. The rotavirus-induced cell death mechanism in Sp2/0-Ag14 cells involved changes in cell membrane permeability, chromatin condensation, and DNA fragmentation, which were compatible with cytotoxicity and apoptosis.

結論:

ロタウイルス単離株Wt1-5、WWM、TRUYO、ECwt-O、WTEWは、ウイルス誘導アポトーシスと互換性のあるメカニズムを介してSp2/0-Ag14細胞に感染し、細胞死を引き起こす能力を持っているため、これらはオンコロイド剤としての潜在的な候補となっています。

CONCLUSIONS: The ability of the rotavirus isolates Wt1-5, WWM, TRUYO, ECwt-O, and WTEW to infect and cause cell death of Sp2/0-Ag14 cells through mechanisms that are compatible with virus-induced apoptosis makes them potential candidates as oncolytic agents.

紹介。El cáncer es la segunda causa de muerte en los Estados Unidos, solamente superado por la enfermedadad cardiovascular.そのため、心臓血管炎は、心臓血管炎の第一の原因として、ヨーロッパ後進国では、第二の死因となっています。このように、心血管疾患は、心血管疾患の第一の原因であると考えられています。また、世界的に見ても、治療システムを代表しており、治療、放射線治療、放射線治療の代替的かつ補完的な戦略を開発する必要があります。 目的。腫瘍細胞に適応したロタウイルスの感染力を評価し、Sp2/0-Ag14ラット血液細胞を感染させたり、リストアップしたりする能力を評価します。 材料と方法。ロタウイルスWt1-5、WWM、TRUYO、ECwt-O、WTEWはSp2/0-Ag14球に接種し、感染性、蛍光光度、インフルエンザのシトメトリー、ADNの断片化アンサエイで感染性の影響を調べた。 結果。ロタウイルスWt1-5、WWM、TRUYO、ECwt-O、WTEWの感染には、多くのタンパク質が関与していることが示唆された。細胞内および細胞外のウイルス抗原の集積は、使用したすべてのウイルスで検出されました。ロタウイルスがSp2/0-Ag14セル内のロタウイルスによって誘発された死因は、細胞膜の透過性、クロマトナの凝縮、ADNの断片化、これらのcuales fueronはcitotoxicidadとアポトーシスと相容れないことに起因しています。 結論。調査されたロタウイルスがSp2/0-Ag14を感染させ、ウイルス性のアポトーシスを誘発するアポトーシスと相溶性のあるメカニズムを用いて、感染症を引き起こす能力があることが明らかになったことは、癌治療薬として利用される可能性のある候補者を示している。

Introducción. El cáncer es la segunda causa de muerte en los Estados Unidos, solamente superado por la enfermedad cardiovascular. Sin embargo, el cáncer aventaja a la enfermedad cardiovascular como primera causa de muerte en doce países de Europa occidental. Se requieren mejores métodos de prevención, diagnóstico y tratamiento para afrontar el gran desafío que el cáncer representa mundialmente para los sistemas de salud, y se necesita desarrollar estrategias alternativas y complementarias a la cirugía, la radioterapia y la quimioterapia convencionales. Objetivo. Evaluar el potencial oncolítico de rotavirus adaptados a células tumorales por su capacidad para infectar y lisar células Sp2/0-Ag14 de mieloma de ratón. Materiales and métodos. Los aislamientos de rotavirus Wt1-5, WWM, TRUYO, ECwt-O y WTEW se inocularon en células Sp2/0-Ag14 y se examinaron sus efectos infecciosos mediante inmunocitoquímica, inmunofluorescencia, citometría de flujo y ensayos de fragmentación del ADN. Resultados. La infección con los rotavirus Wt1-5, WWM, TRUYO, ECwt-O y WTEW implicó la participación de algunas proteínas de choque térmico, la proteína disulfuro isomerasa y la integrina β3. La acumulación de antígenos virales intracelulares y extracelulares se detectó en todos los virus utilizados. Los mecanismos de muerte inducidos por los rotavirus en células Sp2/0-Ag14 indujeron cambios en la permeabilidad de la membrana celular, la condensación de cromatina y la fragmentación de ADN, los cuales fueron compatibles con citotoxicidad y apoptosis. Conclusiones. La capacidad de los rotavirus estudiados para infectar y causar la muerte de células Sp2/0-Ag14 mediante mecanismos compatibles con la apoptosis inducida viralmente los convierte en candidatos potenciales para ser utilizados como agentes oncolíticos.