SCAMP1-TV2をサイレンシングすると、PUM2との相互作用により、INSM1のmRNA分解が促進され、乳がん細胞の悪性生物学的行動が抑制された

Silencing SCAMP1-TV2 Inhibited the Malignant Biological Behaviors of Breast Cancer Cells by Interaction With PUM2 to Facilitate INSM1 mRNA Degradation.

• Wei Tao
• Jun Ma
• Jian Zheng
• Xiaobai Liu
• Yunhui Liu
• Xuelei Ruan
• Shuyuan Shen
• Lianqi Shao
• Jiajia Chen
• Yixue Xue

抄録

分子標的治療は、乳がんの複合治療において重要な役割を果たしています。ロングノンコーディングRNA（LncRNA）は乳がんの進行を制御する上で重要な役割を果たしている。本研究では、分泌キャリア-関連膜タンパク質1-トランスクリプトバリアント2（SCAMP1-TV2）が乳がんにおける潜在的な役割と分子機構を明らかにすることを目的としています。 Cell Counting Kit-8（CCK-8）、RNA Immunoprecipitation（RIP）、およびRNAプルダウンアッセイを用いて、SCAMP1-TV2とプミリオRNA結合ファミリーメンバー2（PUM2）との相互作用を決定した。ルシフェラーゼレポーターアッセイおよびクロマチン免疫沈降（ChIP）アッセイを用いて、ヒトインスリノーマ関連1（INSM1）がSAMおよびSH3ドメイン含有1（SASH1）プロモーターに直接作用することを知った。 サイレンス化されたSCAMP1-TV2は、乳がん細胞の増殖、遊走、浸潤を抑制し、細胞のアポトーシスを促進した。一方、SCAMP1-TV2のダウンレギュレーションは、PUM2との結合を減少させ、PUM2とINSM1のメッセンジャーRNA（mRNA）との結合を増加させ、INSM1のmRNAの分解を促進した。INSM1をサイレンシングすると、SASH1転写に対する阻害効果が減少し、ホスファチジルイノシトール3キナーゼ（PI3K）／タンパク質キナーゼB（AKT）シグナル伝達経路が阻害された。SCAMP1-TV2のサイレンシングとPUM2の過剰発現を併用することで、ヌードマウスにおける異種移植片腫瘍の増殖が有意に抑制された。 SCAMP1-TV2/PUM2/INSM1経路は、乳がん細胞の生物学的挙動を制御する上で重要な役割を果たしている。

Molecular-targeted therapy plays an important role in the combined treatment of breast cancer. Long noncoding RNA (LncRNA) plays a significant role in regulating breast cancer progression. The present study is to reveal the potential roles and molecular mechanism that the secretory carrier-associated membrane protein 1-transcript variant 2 (SCAMP1-TV2) has in breast. Cell Counting Kit-8 (CCK-8), RNA Immunoprecipitation (RIP), and RNA pull-down assays were employed to determine the interactions between SCAMP1-TV2 and Pumilio RNA binding family member 2 (PUM2). The luciferase reporter assays and chromatin immunoprecipitation (ChIP) assays were used to get to know the effect of human insulinoma-associated 1 (INSM1) directly on the SAM and SH3 domain containing 1 (SASH1) promoter. Silenced SCAMP1-TV2 inhibited the proliferation, migration, and invasion of breast cancer cells, and promoted cell apoptosis. Meanwhile, SCAMP1-TV2 downregulation decreased its binding to PUM2 and increased the binding of PUM2 to INSM1 messenger RNA (mRNA), thus promoting the degradation of INSM1 mRNA. Silencing INSM1 decreased its inhibitory effect on SASH1 transcription and inhibited the phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)/protein kinase B (AKT) signaling pathway. The xenograft tumor growth in a nude mice was significantly inhibited by the silencing of SCAMP1-TV2 in combination with the overexpression of PUM2. SCAMP1-TV2/PUM2/INSM1 pathway plays an important role in regulating the biological behavior of breast cancer cells.

Copyright © 2020 Tao, Ma, Zheng, Liu, Liu, Ruan, Shen, Shao, Chen and Xue.