miR-574を有するエクソソソームは、インターフェロンを介してマクロファージからHBV感染肝細胞に抗HBV活性を伝達する

Exosomes with miR-574 transfer anti-HBV activity mediated by the interferon from macrophage to HBV-infected hepatocyte.

• Wenyu Wu
• Di Wu
• Weiming Yan
• Yongli Wang
• Jie You
• Xiaoyang Wan
• Dong Xi
• Xiaoping Luo
• Meifang Han
• Qin Ning

抄録

背景:

インターフェロンα（IFN-α）は、B型肝炎表面抗原（HBsAg）およびB型肝炎ウイルス（HBV）共有結合的に閉じた円形DNA（cccDNA）を抑制する能力を有するため、慢性B型肝炎（CHB）の治療に有効であることが証明されている。しかし、その根底にあるメカニズムは曖昧である。

BACKGROUND: Interferon alpha (IFN-α) has been proven effective in treating chronic hepatitis B (CHB) due to its capability to suppress hepatitis B surface antigen (HBsAg) and hepatitis B virus (HBV) covalently closed circular DNA (cccDNA). However, the underlying mechanisms are blurred.

方法:

ペギル化IFN-α（PegIFN-α）に応答した応答者と非応答者、およびIFN-α処理したTHP-1（ヒト白血病単球細胞株）由来のマクロファージ上清のエクソソームの抗ウイルス活性を調べた。次に、エクソソソームマイクロRNA（miRNA）の発現プロファイルをmiRNAシークエンシングを用いて解析した。ルシフェラーゼレポーターアッセイを用いて、同定されたmiRNAが標的とするHBVゲノム配列の結合位置を特定した。

METHODS: We investigated the antiviral activities of exosomes from responders and non-responders to pegylated IFN-α (PegIFN-α) as well as the supernatants of IFN-α-treated THP-1 (the human leukemia monocyte cell line) derived macrophages. Then the expression profiles of exosomal microRNAs (miRNAs) were analyzed using miRNA sequencing. The luciferase reporter assay was used to locate the binding position of HBV genomic sequence targeted by the identified miRNA.

結果:

PegIFN-α治療を受けた患者のエクソソーム、特に反応者のエクソソーム、およびIFN-α治療を受けたマクロファージの上清は、HBV関連細胞株におけるHBsAg、肝炎B型抗原（HBeAg）、HBV DNA、およびcccDNAレベルの抑制によって明らかになる抗HBV活性を示した。PegIFN-α投与により、エクソソソームのhsa-miR-193a-5p、hsa-miR-25-5p、およびhsa-miR-574-5pがアップレギュレートされ、HBVの複製と転写を部分的に抑制することができました。Hsa-miR-574-5pは、HBVゲノム配列の2750-2757位に結合することで、pgRNAおよびポリメラーゼmRNAレベルを低下させた。

RESULTS: Exosomes from PegIFN-α treated patients particularly responders as well as the supernatants of IFN-α-treated macrophages exhibited anti-HBV activities as manifested by the suppression of HBsAg, hepatitis B e antigen (HBeAg), HBV DNA and cccDNA levels in HBV related cell lines. PegIFN-α treatment upregulated exosomal hsa-miR-193a-5p, hsa-miR-25-5p, and hsa-miR-574-5p that could partially inhibit HBV replication and transcription. Hsa-miR-574-5p reduced pgRNA and polymerase mRNA levels by binding to the 2750-2757 position of HBV genomic sequence.

結論:

エクソソソームは、マクロファージからHBV感染肝細胞にIFN-α関連のmiRNAを移行させることができ、HBVの複製および発現に対して抗ウイルス活性を示す。

CONCLUSIONS: Exosomes can transfer IFN-α-related miRNAs from macrophages to HBV-infected hepatocytes, and exhibit antiviral activities against HBV replication and expression.

© The Author(s) 2020. Published by Oxford University Press for the Infectious Diseases Society of America. All rights reserved. For permissions, e-mail: journals.permissions@oup.com.