LncRNA HCG18は、miR-214-3p/CENPM軸を介して肝細胞癌の進行に寄与している

LncRNA HCG18 contributes to the progression of hepatocellular carcinoma via miR-214-3p/CENPM axis.

• Yuepei Zou
• Zhonghua Sun
• Shuangming Sun

抄録

ロングノンコーディングRNA（lnc）HCG18は、様々な腫瘍の進行に寄与することが報告されていますが、肝細胞癌（HCC）では、その役割は不明です。しかし、肝細胞がん（HCC）におけるHCG18の役割は未だ不明である。本研究では、HCCにおけるHCG18の生物学的機能を明らかにすることを目的としています。定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（qRT-PCR）を行い、HCG18、microRNA-214-3p（miR-214-3p）、セントロメアタンパク質M（CENPM）メッセンジャーRNA（mRNA）の発現を検出した。HCG18の増殖および遊走における役割を、3-(4,5-ジメチルチアゾール-2-イル)-2,5-ジフェニルテトラゾリウムブロマイド(MTT)アッセイ、コロニー形成アッセイ、創傷治癒アッセイおよびフローサイトメトリーin vitroおよびin vivoでの動物実験により評価した。その結果、HCG18はHCC組織で高発現していることが明らかになった。HCG18をサイレンシングすることで、HCG18は増殖と遊走を抑制し、アポトーシスを誘導することが明らかになった。また、miR-214-3pはHCG18の発現を低下させていることが明らかになった。さらに、miR-214-3pはHCG18に直接結合し、HCG18-1の影響を打ち消す抗腫瘍作用を持つことが明らかになった。さらに、miR-214-3pはCENPM mRNAと直接相互作用し、CENPMの発現を低下させていた。一方、HCG18はmiR-214-3pのスポンジとして作用してCENPMの発現をアップレギュレートした。これらの結果から、HCG18はmiR-214-3p/CENPM軸を介してHCC細胞の増殖と遊走を促進する癌遺伝子として機能していることが示唆された。

Long non-coding RNA (lnc) HCG18 has been reported to contribute progression of a variety of tumors. However, its roles in hepatocellular carcinoma (HCC) remains unknown. In the current study, we intended to uncover the biological functions of HCG18 in HCC. Quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) was conducted to detect the expression of HCG18, microRNA-214-3p (miR-214-3p) and centromere protein M (CENPM) messenger RNA (mRNA). The role of HCG18 in the growth and migration were assessed by 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay, colony formation assay, wound healing assay and flow cytometry in vitro and animal experiments in vivo. The results showed that HCG18 was highly expressed in HCC tissues. HCG18 silencing inhibited the proliferation and migration while induced the apoptosis of HCC cells. Besides, miR-214-3p was downregulated in HCC cells. Further experiments revealed that miR-214-3p could directly bind to HCG18 and exerted an anti-tumor role to counteracted siHCG18-1-mediated influence in HCC cells. Moreover, miR-214-3p could directly interact with CENPM mRNA and down-regulating the expression of CENPM. While HCG18 could up-regulated the expression of CENPM through acting as a sponge of miR-214-3p. Therefore, those results suggested HCG18 functioned as an oncogene to promote the proliferation and migration of HCC cells via miR-214-3p/CENPM axis.

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