小児のPh様ALL患者で同定された新規融合タンパク質PAX5-KIDINS220の機能解析

Functional analysis of a novel fusion protein PAX5-KIDINS220 identified in a pediatric Ph-like ALL patient.

• Takuyo Kanayama
• Toshihiko Imamura
• Azusa Mayumi
• Emi Soma
• Kenichi Sakamoto
• Fumihiko Hayakawa
• Akihiko Tanizawa
• Nobutaka Kiyokawa
• Hajime Hosoi

抄録

PAX5-KIDINS220（PAX5-K220）は、小児フィラデルフィア染色体（Ph）様急性リンパ芽球性白血病（ALL）患者から同定された新規キメラ融合遺伝子であるが、コードされた融合タンパク質の機能はまだ解析されていない。ここでは、PAX5-K220のin vitroでの機能解析を報告する。我々は、PAX5-K220発現細胞の作製に成功し、PAX5-K220が核タンパク質であることを実証した。ルシフェラーゼレポーターアッセイにより、PAX5-K220は他のPAX5関連融合タンパク質と同様に野生型PAX5転写活性をドミナントネガティブに阻害し、リンパ球の分化ブロックに寄与する可能性があることが明らかになった。しかし、PAX5-K220は、Ph様ALLで同定されたものの、IL-3依存性Ba/F3マウス白血病細胞に導入した場合、IL-3非依存性の増殖を誘導することはなく、むしろ増殖を減衰させることが明らかになった。これらの結果から、PAX5-K220は、Ph-like ALLで同定されたチロシンキナーゼ活性を持つ他の融合タンパク質よりも、他のPAX5関連融合タンパク質と確実に性格を共有しており、増殖活性には寄与していないことが明らかになった。今後、PAX5に関連する転座やその影響をより深く理解するためには、パートナーの異なるPAX5融合タンパク質の精密な機能解析が必要であると考えられる。

PAX5-KIDINS220 (PAX5-K220) is a novel chimeric fusion gene identified in a pediatric Philadelphia chromosome (Ph)-like acute lymphoblastic leukemia (ALL) patient, but the function of the encoded fusion protein has not yet been analyzed. Here, we report the functional analysis of PAX5-K220 in vitro. We successfully generated PAX5-K220 expressing cells and demonstrate that PAX5-K220 is a nuclear protein. Luciferase reporter assay reveals that PAX5-K220 inhibits wild-type PAX5 transcriptional activity in a dominant-negative fashion like other PAX5-related fusion proteins, and may contribute to lymphocyte differentiation block. However, although identified in Ph-like ALL, PAX5-K220 does not induce IL-3-independent proliferation when transduced in the IL-3-dependent Ba/F3 murine leukemia cells, but rather attenuates growth. These results reveal that PAX5-K220 certainly shares the character with other PAX5-related fusion proteins rather than other fusion proteins with tyrosine kinase activity identified in Ph-like ALL, and did not contribute to proliferation activity. Precise functional analysis of each differently partnered PAX5 fusion protein is warranted in the future for better understanding of PAX5-related translocations and their effects.