UHPLC-MS/MSによる3種のTaxusの小枝と葉に含まれるタクソイドとフラボノイドの同時定量

Simultaneous determination of taxoids and flavonoids in twigs and leaves of three Taxus species by UHPLC-MS/MS.

• Qing-Yan Gai
• Jiao Jiao
• Xin Wang
• Jing Liu
• Yu-Jie Fu
• Yao Lu
• Zi-Ying Wang
• Xiao-Jie Xu

抄録

タクソウ属は、抗がん剤（特にパクリタキセル）や健康に有益なフラボノイドの存在により高い関心を集めている。今回初めて、3種のキク科植物の小枝と葉に含まれる7種のタキソイドと7種のフラボノイドを同時に定量するためのUHPLC-MS/MS法を開発した。Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 カラム (50 mm × 2.1 mm I.D.、1.8 μm) を使用し、アセトニトリル-水勾配溶出プログラムを使用して、5 分間の実行時間で 14 種類の目的化合物を十分に分離することができました。選択された反応モニタリング収集モードでの全分析物の質量遷移は、最高のシグナル強度を得るために体系的に最適化されました。全成分の回帰式は0.9990以上の係数を持つ優れた直線性を示し、全成分の定量下限は0.01～1.66 ng/mLであった。全分析物の日内および日間の精度（相対標準偏差）は、保持時間で4.17%以下、ピーク面積で7.42%以下であり、全分析物のスパイク標準回収率は96.85%から104.77%であった。また、本研究で提案した方法を用いて、14種類の目的化合物の、シナノキ、キク科植物の枝葉中の分布を明らかにすることができた。以上の結果から、本研究は迅速かつ有効なUHPLC-MS/MS法を提供し、医薬品や栄養補助食品の品質管理や適用性評価に有用であるだけでなく、他のタクソウ属のタクソウ属やフラボノイドの系統的分析にも有用であることが明らかになった。

Taxus species are highly concerned due to the presence of anticancer taxoids (especially paclitaxel) and health beneficial flavonoids. For the first time, an UHPLC-MS/MS method was developed for the simultaneous determination of seven taxoids and seven flavonoids in twigs and leaves of three Taxus species. The satisfactory separation of fourteen target compounds was achieved within 5 min of running time on an Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 column (50 mm × 2.1 mm I.D., 1.8 μm) using an acetonitrile-water gradient elution program. Mass transitions of all analytes in selected reaction monitoring acquisition mode were systematically optimized for obtaining the highest signal intensities. Regression equations of all analytes exhibited excellent linearities with coefficients higher than 0.9990, and the lowest limits of quantification of all analytes ranged from 0.01 to 1.66 ng/mL. The intra- and inter-day precisions (relative standard deviations) of all analytes were less than 4.17% for retention time and less than 7.42% for peak area, and the spiking standard recoveries of all analytes ranged from 96.85%-104.77%. By the aid of the proposed method, the distribution of fourteen target compounds in twigs and leaves of Taxus chinensis, Taxus cuspidata, and Taxus media was clearly figured out. Overall, the present work provided a rapid and valid UHPLC-MS/MS approach, which could not only be useful for quality control and applicability assessment of twigs and leaves of the three Taxus species in pharmaceutical and nutraceutical industries, but also offer a good reference for the systematic analysis of taxoids and flavonoids in other Taxus species.

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