miR-328-3p過剰発現は、小胞体メタロプロテアーゼ1を標的としたAKTリン酸化阻害を介して肝癌の悪性増殖・浸潤を抑制する

miR-328-3p overexpression attenuates the malignant proliferation and invasion of liver cancer via targeting Endoplasmic Reticulum Metallo Protease 1 to inhibit AKT phosphorylation.

• Hua Lu
• Jiali Hu
• Jianping Li
• Weifeng Lu
• Xiaofan Deng
• Xu Wang

抄録

背景:

肝臓がんは世界的に最も一般的ながんの一つであり、マイクロRNA（miRNA）は、異なるタイプのがんの低侵襲な予後マーカーとして認識されています。本研究では、肝臓がんに対するmiR-328-3pの緩和効果を評価した。

Background: Liver cancer is one of the most common cancers worldwide. microRNAs (miRNAs) have been recognized as minimally invasive prognostic markers for distinct types of cancer. This study evaluates the mitigation role of miR-328-3p on liver cancer and .

方法:

実験には肝癌細胞株Huh-7とHepG2を用いた。miR-328-3pを過剰発現させると、対照群と比較して、Huh-7細胞の増殖、浸潤、アポトーシスが抑制され、miR-328-3pと小胞体メタロプロテアーゼ1()は優れたターゲティング関係を示した。また、miR-328-3p模倣群とpcDNA-共トランスフェクション群では、pcDNA-トランスフェクション群と比較して、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTORの比率が有意に低下していた。動物モデルは、4週齢の免疫不全BABL/c雌ヌードマウスを用いて設定した。miR-328-3pを保持したレンチウイルスまたは空ベクターでトランスフェクションしたHuh-7細胞をそれぞれBABL/cヌードマウスの右背側に注入した。腫瘍体積は５日ごとに測定した。1ヶ月後、動物を犠牲にし、異種移植腫瘍を解剖し、RT-PCRおよび免疫組織化学的アッセイのために体重を測定した。

Methods: Liver cancer cell line Huh-7 and HepG2 were used for experiments. Compared with the control group, miR-328-3p overexpression inhibited the proliferation, invasion, and promoted apoptosis of Huh-7 cells. miR-328-3p and endoplasmic reticulum metalloprotease 1 () had an excellent targeting relationship. Compared with the pcDNA- transfection group, the ratios of p-PI3K/PI3K, p-AKT/AKT, and p-mTOR/mTOR in miR-328-3p mimic and pcDNA- co-transfection group were significantly decreased. Animal models were set up using four-week-old immunodeficient BABL/c female nude mice. Huh-7 cells transfected with lentivirus holding miR-328-3p or empty vector were injected into the right dorsal side of BABL/c nude mice, respectively. Tumor volume was measured every five days. After one month, animals were sacrificed, xenograft tumors were dissected and weighed for RT-PCR and immunohistochemical assays.

結果:

miR-328-3p の過剰発現は、対照群と比較して、30 日後の腫瘍重量（0.46±0.07 0.11±0.05 g、P<0.05）および腫瘍体積（1876±321 543±168 mm、P<0.05）を有意に抑制した。miR-328-3pの過剰発現は、Ki67陽性細胞、N-カドヘリン陽性細胞、ビメンチン陽性細胞の割合を有意に減少させた。

Results: Compared with control group, miR-328-3p overexpression significantly inhibited tumor weight (0.46±0.07 0.11±0.05 g, P<0.05) and tumor volume (1876±321 543±168 mm, P<0.05) after thirty days. miR-328-3p overexpression significantly downregulated the percentage of Ki67 positive cells, N-cadherin positive cells and vimentin positive cells.

結論:

これらの結果から、miR-328-3pは肝臓がんの新たな治療法や予後の新規マーカーになる可能性が示唆されました。

Conclusions: These findings suggested that miR-328-3p could be a new treatment or a novel marker for liver cancer prognosis.

2020 Annals of Translational Medicine. All rights reserved.