circNRIP1のダウンレギュレーションがアポトーシスを促進し、miR-182/ROCK1軸による胃がん細胞の移動・浸潤を抑制することを明らかにした

Down-Regulation of circNRIP1 Promotes the Apoptosis and Inhibits the Migration and Invasion of Gastric Cancer Cells by miR-182/ROCK1 Axis.

• Lu Liang
• Lu Li

抄録

目的:

circRNA核内受容体相互作用タンパク質1（circNRIP1）は、胃癌の癌遺伝子としての役割を果たすことが報告されている。しかし、circNRIP1が胃がんの進行に関与しているメカニズムは、まだ十分に解明されていません。

Aim: Circular RNAs (circRNAs) play important roles in the progression of human cancers. circRNA nuclear receptor interacting protein 1 (circNRIP1) has been reported to play as an oncogene in gastric cancer. However, the mechanism underlying circNRIP1 in gastric cancer progression is far from understood.

患者さんと方法:

本研究では、胃癌患者45名を募集し、患者の全生存期間を解析した。胃癌細胞株MGC-803とAGS細胞を培養し、in vitroでの研究を行った。circNRIP1、microRNA (miR)-182、およびrho-associated protein kinase 1 (ROCK1)の発現レベルを定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応またはウェスタンブロットにより検出した。細胞の遊走、浸潤、細胞周期分布およびアポトーシスは、それぞれトランスウェル、フローサイトメトリーおよびウェスタンブロットアッセイによって決定された。また、miR-182とcircNRIP1またはROCK1との標的関連は、ルシフェラーゼレポーターアッセイおよびRNA免疫沈降法により評価した。

Patients and Methods: Forty-five gastric cancer patients were recruited and overall survival of patients was analyzed. Gastric cancer cell lines MGC-803 and AGS cells were cultured for study in vitro. The expression levels of circNRIP1, microRNA (miR)-182 and rho-associated protein kinase 1 (ROCK1) were detected by quantitative real-time polymerase chain reaction or Western blot. Cell migration, invasion, cell cycle distribution and apoptosis were determined by transwell, flow cytometry and Western blot assays, respectively. The target association between miR-182 and circNRIP1 or ROCK1 was assessed by luciferase reporter assay and RNA immunoprecipitation.

結果:

circNRIP1の発現は胃がんの組織や細胞で増加し、circNRIP1の高発現は患者の生存率が低いことを示唆していた。また、circNRIP1をノックダウンすると、細胞の遊走や浸潤が抑制され、G0-G1期の細胞周期が停止し、アポトーシスが促進されることを明らかにした。さらに、rock1はmiR-182の標的となり、circNRIP1によって競合的に制御されていることが確認された。

Results: circNRIP1 expression was enhanced in gastric cancer tissues and cells and high expression of circNRIP1 indicated poor survival of patients. Knockdown of circNRIP1 suppressed cell migration and invasion, arrested cell cycle at G0-G1 phase and promoted apoptosis in gastric cancer cells. miR-182 was a target of circNRIP1 and its deficiency reversed the effect of circNRIP1 silence on cell migration, invasion, cell cycle distribution and apoptosis in gastric cancer cells. Moreover, ROCK1 was validated as a target of miR-182 and competitively regulated by circNRIP1.

結論:

circNRIP1 の発現を抑制すると、miR-182 の増加と ROCK1 の減少により胃癌の進行が抑制され、胃癌治療の新たなターゲットとなることが示された。

Conclusion: Silence of circNRIP1 inhibited progression of gastric cancer by increasing miR-182 and decreasing ROCK1, providing a novel target for the treatment of gastric cancer.

© 2020 Liang and Li.