舌扁平上皮癌細胞株Cal-27の浸潤に対するヒト骨髄間葉系幹細胞の効果

[Effect of human bone marrow mesenchymal stem cells on invasion of tongue squamous cell carcinoma cell line Cal-27].

• Zhu-Qing Xu
• Xin-Yu Zhang
• Shao-Ru Wang
• Tao Li
• Gang Dong
• Feng-Mei Li
• Jian-Jin Zheng
• Yun-Ying Wang
• Xiao-Na Xu

抄録

目的:

ヒト骨髄間葉系幹細胞（hBM-MSCs）が舌扁平上皮癌細胞株Cal-27の浸潤に及ぼす影響とそのメカニズムを検討することを目的として、ヒト骨髄間葉系幹細胞（hBM-MSCs）が舌扁平上皮癌細胞株Cal-27の浸潤に及ぼす影響を検討した。

PURPOSE: To investigate the effect of human bone marrow mesenchymal stem cells (hBM-MSCs) on invasion of tongue squamous cell carcinoma cell line Cal-27 and its mechanism.

方法:

hBM-MSCsとCal-27をそれぞれ培養し、倒立顕微鏡下で細胞の形態を観察した。hBM-MSCsとCal-27を共培養してCal-27細胞を得た。スクラッチテストによりCal-27の遊走面積を観察した；トランスウェル遊走・浸潤実験を行い、Cal-27の遊走・浸潤を観察した後、棒グラフを描画した。蛍光定量PCRを用いて、腫瘍マーカーであるE-カドヘリン、ツイスト、ナメクジ、カタツムリ、MMP-2、MMP-9の遺伝子発現に対するhBM-MSCsの影響を観察した。ウェスタンブロットを用いて、Cal-27の浸潤に関連するMMP-2およびMMP-9のタンパク質発現に対するhBM-MSCsの効果を観察した。統計解析には、SPSS 19.0 ソフトウェアパッケージを使用した。

METHODS: hBM-MSCs and Cal-27 were cultured respectively, and the morphology of the cells was observed under an inverted microscope. The co-cultured Cal-27 cells were obtained by co-culture of hBM-MSCs and Cal-27. The migration area of Cal-27 was observed by scratch test;transwell migration and invasion experiments were performed to observe migration and invasion of Cal-27, and a bar graph was then drawn. Fluorescence quantitative PCR was used to observe the effect of hBM-MSCs on gene expression of the tumor markers E-cadherin, twist, slug, snail, MMP-2 and MMP-9. Western blot was used to observe the effect of hBM-MSCs on protein expression of MMP-2 and MMP-9, related to the invasion of Cal-27. SPSS 19.0 software package was used for statistical analysis of the data.

結果:

hBM-MSCsの影響下では、Cal-27の浸潤が促進され、E-カドヘリンのダウンレギュレーション、ツイスト、ナメクジ、カタツムリ、MMP-2、MMP-9の発現のアップレギュレーションを伴っていた。

RESULTS: Under the influence of hBM-MSCs, the invasion of Cal-27 was promoted, accompanied by down-regulation of E-cadherin, up-regulation of twist, slug, snail, MMP-2, MMP-9 and up-regulation of MMP-2 and MMP-9 expression.

結論:

hBM-MSCsはCal-27細胞の浸潤を促進することができ、Cal-27細胞の浸潤に関連する腫瘍マーカーの発現のアップレギュレーションと関連している可能性がある。

CONCLUSIONS: hBM-MSCs can promote invasion of Cal-27 cells, which may be related to up-regulation of the expression of tumor markers related to invasion of Cal-27 cells.