サーチュイン6は、オートファジーを調節することにより、LPS誘発性炎症やアポトーシスからヒト網膜色素上皮細胞を部分的に保護している

Sirtuin 6 protects human retinal pigment epithelium cells from LPS-induced inflammation and apoptosis partly by regulating autophagy.

• Jingjing Liu
• Dan Liu

抄録

リポ多糖類（LPS）誘導性網膜炎症は網膜疾患の重要な因子である。本研究は、LPS誘導網膜傷害に対するSirt6の効果を調べることを目的とした。ARPE-19細胞をLPSでインキュベートして炎症を誘導した。細胞生存率はCCK-8アッセイを用いて決定した。対応する遺伝子のmRNAレベルおよびタンパク質発現は、それぞれqRT-PCRおよびウエスタンブロットを用いて検出した。炎症性サイトカインの産生はELISAキットを用いて測定した。酸化ストレス関連因子の検出キットを用いて、酸化ストレス関連因子のレベルを測定した。細胞のアポトーシスはTUNELアッセイを用いて観察した。その結果，LPS処理後にSirt6がダウンレギュレーションされることが示された．Sirt6はLC3II/I、beclin1、ATG5の発現を促進することで、LPS誘発オートファジーを増強した。また，Sirt6はLPSによる炎症，酸化ストレス，細胞のアポトーシスを有意に抑制し，3MAによりその一部が抑制された。これらの結果から、Sirt6はLPS誘発性炎症、酸化ストレス、細胞のオートファジーを調節することにより、LPS誘発性炎症、酸化ストレス、アポトーシスの重要な制御因子であることが示唆された。

Lipopolysaccharides (LPS)-induced retinal inflammation is an important factor in retinal diseases. This study was aimed to investigate the effect of Sirt6 on LPS-induced retinal injury. ARPE-19 cells were incubated with LPS to induce inflammation. The cell viability was determined using CCK-8 assay. The mRNA level and protein expression of corresponding genes was detected using qRT-PCR and western blot, respectively. The production of inflammatory cytokines was measured using ELISA kit. The levels of oxidative stress-related factors were measured using their detection kits. Cell apoptosis was observed using TUNEL assay. The results showed that Sirt6 was downregulated after LPS treatment. Sirt6 strengthened LPS-induced autophagy by promoting the expression of LC3II/I, beclin1 and ATG5. Sirt6 treatment significantly inhibited LPS-induced inflammation, oxidative stress and cell apoptosis, which was then partly abolished by 3 MA. These results suggest Sirt6 to be an important regulator for LPS-induced inflammation, oxidative stress, and apoptosis partly by regulating cell autophagy.