α1アドレナリン受容体拮抗薬のシナプス後感度に対する効果の違い。ラットの腰仙骨脊髄からの実質性ゼラチノサ下層神経細胞のシナプス後電流抑制のためのスライスパッチクランプ法を使用しています

Differential Effects of Alpha 1-Adrenoceptor Antagonists on the Postsynaptic Sensitivity: Using Slice Patch-Clamp Technique for Inhibitory Postsynaptic Current in Substantia Gelatinosa Neurons From Lumbosacral Spinal Cord in Rats.

• Daisuke Uta
• Tsuyoshi Hattori
• Megumu Yoshimura

抄録

目的:

α1-アドレナリン受容体は、男性の下部尿路症状の貯蔵症状の改善に関与している。しかし、これらの化合物の作用機序は不明のままである。本研究の目的は、ラットの腰椎脊髄からの実質性ゼラチノサ（SG）ニューロンにおけるγ-アミノ酪酸（GABA）/グリシンを介した抑制性シナプス後電流（IPSC）の外向き電流に対するα1-アドレナリン受容体拮抗薬の効果を明らかにすることであった。

PURPOSE: Alpha1-adrenoceptors participate in improving storage symptoms of male lower urinary tract symptoms. However, the mechanism of action of these compounds remains unclear. The goal of the present study was to clarify the effect of α1- adrenoceptor antagonists on γ-aminobutyric acid (GABA)/glycine-mediated outward currents of the inhibitory postsynaptic current (IPSC) in substantia gelatinosa (SG) neurons from the lumbosacral spinal cord in rats.

方法:

雄の成体Sprague-Dawleyラットを使用した。ブラインド全細胞パッチクランプ記録は、単離された脊髄スライス標本からのSGニューロンで行われた。IPSCは、ナフトピジル（100μM）、タムスロシン（100μM）、シロドシン（30μM）、またはプラゾシン（10μM）がウォッシュアウト期間を挟んで順次適用された個々のSGニューロンで記録された。ナフトピジルの前にストリキニン(2μM)、ビクリン(10μM)、テトロドトキシン(TTX)(1μM)を添加した。個々の外向き電流を解析した。

METHODS: Male adult Sprague-Dawley rats were used. Blind whole-cell patch-clamp recordings were performed in SG neurons from isolated spinal cord slice preparations. IPSCs were recorded in individual SG neurons to which naftopidil (100μM), tamsulosin (100μM), silodosin (30μM), or prazosin (10μM) were applied sequentially with intervening washout periods. Strychnine (2μM), bicuculline (10μM), or tetrodotoxin (TTX)(1μM) were added before naftopidil. Individual outward currents were analyzed.

結果:

ナフトピジルを浴用すると、52個中13個のSGニューロンで外向きIPSCが得られた。ナフトピジルの反応はTTXの存在下では変化しなかった。ナフトピジルの1回目と2回目の塗布の間の外向き電流の回帰分析を行ったところ、ピアソン相関係数0.996、直線の傾き0.983が得られた。ナフトピジル誘発性の外向き電流は、ストリキニーネおよび/またはビクーリンの存在下で減衰した。タムスロシン、シロドシン、プラゾシンによって誘導されたGABA/グリシンを介した外向き電流は、ナフトピジルで得られたものよりも小さかった。

RESULTS: The bath application of naftopidil, yielded outward IPSCs in 13 of 52 SG neurons. The naftopidil response was unchanged in the presence of TTX. Regression analysis of the outward currents between the 1st and 2nd applications of naftopidil revealed a Pearson correlation coefficient of 0.996 with a line slope of 0.983. The naftopidil-induced outward current was attenuated in the presence of strychnine and/or bicuculline. The GABA/glycine-mediated outward currents induced by tamsulosin, silodosin, and prazosin were smaller than those obtained with naftopidil.

結論:

ラット脊髄のL6-S1レベルから調製したSGニューロンのサブセットにおけるナフトピジル誘発GABA/グリシン媒介外向き電流。その結果、α1-アドレナリン受容体拮抗薬、特にナフトピジルは、過分極を媒介することで（一部）神経抑制を誘導することが示された。この反応は、グリシン作動性および／またはGABA作動性の神経伝達に関連している。ナフトピジルは、脊髄のSGニューロンにおける過分極に起因する副次的な効果として、独り言反射を抑制し、蓄尿症状を改善する可能性がある。

CONCLUSION: Naftopidil-induced GABA/glycine-mediated outward currents in a subset of SG neurons prepared from the L6- S1 level of rat spinal cord. The results indicated that α1-adrenoceptor antagonists, particularly naftopidil, induce neural suppression (in part) by mediating hyperpolarization. The response is associated with glycinergic and/or GABAergic neural transmission. Naftopidil may suppress the micturition reflex and improve urinary storage symptoms as a subsidiary effect resulting from hyperpolarization in SG neurons of the spinal cord.