シリカコートプラスチックチューブを用いて作製した濃縮成長因子マトリックスは、ガラスチューブを用いて作製したものと血小板の分布に違いがあることを明らかにした。新規な近赤外イメージングに基づく定量的手法の応用

Concentrated Growth Factor Matrices Prepared Using Silica-Coated Plastic Tubes Are Distinguishable From Those Prepared Using Glass Tubes in Platelet Distribution: Application of a Novel Near-Infrared Imaging-Based, Quantitative Technique.

• Sadahiro Yamaguchi
• Hachidai Aizawa
• Atsushi Sato
• Tetsuhiro Tsujino
• Kazushige Isobe
• Yutaka Kitamura
• Taisuke Watanabe
• Hajime Okudera
• Carlos Fernando Mourão
• Tomoyuki Kawase

抄録

血小板リッチフィブリン（PRF）マトリックスは、凝固因子XIIがガラス表面によって活性化されるため、凝固因子の助けを借りずに、もともとは普通のガラス管を用いて調製されていた。最近では、ガラス管の代わりにシリカコーティングされたプラスチック管を使用することが推奨されています。これは、医療用ガラス管が市場に不足しているだけでなく、シリカコートプラスチック管の方が凝固活性が高く、PRFの品質が同等であることに起因している。しかし、これらのマトリックスは同じではありません。その違いを評価するために、濃縮成長因子（ＣＧＦ）中の血小板の分布および量の点で、ガラス被覆プラスチックチューブとシリカ被覆プラスチックチューブを比較した。CGFマトリックスは、採取したばかりの血液サンプルから直ちに調製し、赤血栓除去後に固定し、矢状に2等分した。片方をＣＤ４１検出に使用し、もう片方をアイソタイプコントロールとして適用した。CGFマトリックス中の血小板の分布を、埋め込みまたは切片化せずに、不可視近赤外イメージングを用いた新規な方法で調べた。脱水した膜状CGFマトリックスは、より透明であった。このようにして、蛍光シグナルは散乱が少なく明確に検出可能であった。血小板は主にガラス製のCGFマトリックスの遠位側に分布していたが、シリカ製のCGFマトリックスでは均一に分布していた。血小板数は蛍光強度と正の相関があった。まだ完全には開発されていないが、このイメージング技術は、走査型電子顕微鏡法や従来の免疫組織化学的手法の技術的限界に起因するバイアスを排除することにより、CGFマトリックス中の血小板の分布と量の違いを認識することを可能にした。

Platelet-rich fibrin (PRF) matrices were originally prepared using plain glass tubes without the aid of coagulation factors because coagulation factor XII is activated by glass surfaces. Recently, the use of silica-coated plastic tubes as a substitute of glass tubes has been recommended for PRF preparation. This recommendation is owing not only to the shortage of glass tubes for medical use in the market, but also the higher coagulation activity of silica-coated plastic tubes and equal quality of PRF. However, these matrices are not the same. To evaluate the differences, we compared glass- and silica-coated plastic tubes in terms of platelet distribution and quantity in concentrated growth factors (CGF). CGF matrices were immediately prepared from freshly collected blood samples, fixed after red thrombus removal, and divided into two equal pieces sagittally. One piece was used for CD41 detection and the other was applied as an isotype control. Platelet distribution in CGF matrices was examined, without embedding or sectioning, by a novel method using invisible near-infrared imaging. The dehydrated membranous CGF matrix was more transparent. Thus, the fluorescence signal was clearly detectable with less scattering. Platelets were distributed mainly in the distal side of the glass-prepared CGF matrix, but homogeneously in the silica-prepared CGF matrix. Platelet count was positively correlated with fluorescence intensity. Although not yet fully developed, this imaging technique enabled us to recognize the differences in platelet distribution and quantity in CGF matrices by excluding bias caused by the technical limitations of scanning electron microscopy and conventional immunohistochemical methods.

Copyright © 2020 Yamaguchi, Aizawa, Sato, Tsujino, Isobe, Kitamura, Watanabe, Okudera, Mourão and Kawase.