FYNとABLはDCBLD受容体ファミリーの相互作用ネットワークを制御している

FYN and ABL regulate the interaction networks of the DCBLD receptor family.

• Anna M Schmoker
• Jaye L Weinert
• Jacob M Markwood
• Kathryn S Albretsen
• Michelle L Lunde
• Marion E Weir
• Alicia M Ebert
• Karen L Hinkle
• Bryan A Ballif

抄録

Discoidin, CUB, and LCCL domain-containing protein (DCBLD)ファミリーは、2つのタイプI膜貫通型足場受容体であるDCBLD1とDCBLD2から構成されており、発育や癌において重要な役割を果たしている。非受容体チロシンキナーゼであるFYNとABLは、DCBLDファミリーメンバーの細胞内ドメイン内のYXXPモチーフのチロシン残基のリン酸化を駆動することが知られており、これがアダプターCT10レギュレーターオブキナーゼ（CRK）とCRK-like（CRKL）のSrcホモロジー2（SH2）ドメインのリクルートにつながることが知られている。我々は以前に、DCBLDファミリーYXXPモチーフのFYNおよびABL駆動型リン酸化を特徴付けた。しかし、我々はDCBLD1とDCBLD2上の追加のFYNおよびABL依存性のリン酸化部位を同定した。このことは、CRKとCRKL以外にも、FYNとABLの活性によって制御されているDCBLDインタラクターが存在する可能性を示唆している。本研究では、DCBLDファミリーメンバーのFYNとABLに制御されたインタラクトームをマッピングした定量的なプロテオミクス手法を報告する。その結果、FYNとABLは、アダプターの14-3-3ファミリーのメンバーを含むいくつかのシグナル分子のDCBLD1とDCBLD2への結合を制御していることがわかった。DCBLD2/14-3-3相互作用を生化学的に調べたところ、ABLによって誘導された14-3-3-3ファミリーメンバーのDCBLD2への直接結合が明らかになった。

The Discoidin, CUB, and LCCL domain-containing protein (DCBLD) family consists of two type-I transmembrane scaffolding receptors, DCBLD1 and DCBLD2, which play important roles in development and cancer. The non-receptor tyrosine kinases FYN and ABL are known to drive phosphorylation of tyrosine residues in YXXP motifs within the intracellular domains of DCBLD family members, which leads to the recruitment of the Src homology 2 (SH2) domain of the adaptors CT10 regulator of kinase (CRK) and CRK-like (CRKL). We previously characterized the FYN- and ABL-driven phosphorylation of DCBLD family YXXP motifs. However, we have identified additional FYN- and ABL-dependent phosphorylation sites on DCBLD1 and DCBLD2. This suggests that beyond CRK and CRKL, additional DCBLD interactors may be regulated by FYN and ABL activity. Here, we report a quantitative proteomics approach in which we map the FYN- and ABL-regulated interactomes of DCBLD family members. We found FYN and ABL regulated the binding of several signaling molecules to DCBLD1 and DCBLD2, including members of the 14-3-3 family of adaptors. Biochemical investigation of the DCBLD2/14-3-3 interaction revealed ABL-induced binding of 14-3-3 family members directly to DCBLD2.

Published under license by The American Society for Biochemistry and Molecular Biology, Inc.