ムピロシン，フシジン酸および／またはレタパムリン抵抗性を有するメチシリン耐性黄色ブドウ球菌の有病率と分子解析

Prevalence and molecular characterization of methicillin-resistant Staphylococcus aureus with mupirocin, fusidic acid and/or retapamulin resistance.

• Wenjing Chen
• Chunyan He
• Han Yang
• Wen Shu
• Zelin Cui
• Rong Tang
• Chuanling Zhang
• Qingzhong Liu

抄録

背景:

中国から分離されたメチシリン耐性黄色ブドウ球菌（MRSA）におけるムピロシン（MUP），フシジン酸（FA），レタパムリン（RET）に対する耐性の有病率に関するデータはまだ限られている。本研究では，中国東部から分離されたMRSA臨床分離株1206株を対象に，これら3つの抗生物質耐性を検討した。表現型的なMUP、FA、RET耐性は最小阻害濃度（MIC）により、遺伝子型的にはmupA/B、fusB-D、cfr、vgaA/Av/A/B/C/E、lsaA-C/E、salA、およびileS、fusA/E、rplC、23S RNA Vドメインの変異をPCRおよびDNAシークエンシングにより決定した。抵抗性分離株の遺伝的特徴は、パルスフィールドゲル電気泳動（PFGE）および多焦点配列タイピング（MLST）により行った。

BACKGROUND: The data on the prevalence of resistance to mupirocin (MUP), fusidic acid (FA) and retapamulin (RET) in methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) from China are still limited. This study aimed to examine these three antibiotics resistance in 1206 MRSA clinical isolates from Eastern China. Phenotypic MUP, FA and RET resistance was determined by minimum inhibitory concentrations (MICs), and genotypic by PCR and DNA sequencing of the mupA/B, fusB-D, cfr, vgaA/Av/A/B/C/E, lsaA-C/E and salA and mutations in ileS, fusA/E, rplC, and 23S RNA V domain. The genetic characteristics of resistance isolates were conducted by pulsed field gel electrophoresis (PFGE) and multilocus sequence typing (MLST).

結果:

MRSAのMUP耐性、FA耐性、RET耐性は全体的に低かった（それぞれ5.1、1.0、0.3％）。MupAは高レベルMUP耐性のメカニズムであった。低レベルMUP耐性株はすべてIleSにN213Dの変異を有していたが，そのうち2株はロスマンフォールドに影響を及ぼすV588Fの変異を報告していた．高位耐性株ではL461K，H457Q，H457Y，V90IなどのFusA変異が主要なFA機構であり，その多くはFusCを含むものであったが，低位耐性株はすべてFusBを保有していた。RET耐性株の中では，1株にlsaE遺伝子が検出された以外には，他の耐性機序は認められなかった．また，PFGEは16種類（A～P）が認められ，そのうちB型が最も多く（49/76株，64.5％），次いでE型，G型（4/76株，5.3％），C型，M型（3/76株，3.9％）の順であった。すべての耐性株をMLSTにより15種類のST型に分類した。ST764型（24/76、31.6％）、ST630型（11/76、14.5％）、ST239型（9/76、11.8％）、ST5型（7/76、9.2％）が主な型であった。前述のSTを有するPFGE B型分離株は主にムピロシン耐性株に認められた。

RESULTS: Overall MRSA MUP, FA and RET resistance was low (5.1, 1.0 and 0.3%, respectively). MupA was the mechanism of high-level MUP resistance. All low-level MUP resistance isolates possessed an equivocal mutation N213D in IleS; of these, 2 reported an additional V588F mutation with an impact on the Rossman fold. FusA mutations, such as L461K, H457Q, H457Y and V90I were the primary FA mechanisms among high-level resistance isolates, most of which also contained fusC; however, all low-level resistance strains carried fusB. Except lsaE gene detected in one isolate, no other resistance mechanisms tested were found among RET-resistant isolates. Additionally, sixteen PFGE types (A-P) were observed, among which type B was the most common (49/76, 64.5%), followed by types E and G (4/76, 5.3% each) and types C and M (3/76, 3.9% each). All resistant strains were divided into 15 ST types by MLST. ST764 (24/76, 31.6%), ST630 (11/76, 14.5%), ST239 (9/76, 11.8%) and ST5 (7/76, 9.2%) were the major types. PFGE type B isolates with the aforementioned STs were mainly found in mupirocin resistant isolates.

結論:

MUP, FA, RETはMRSA分離株に対して高い活性を示した。MUPおよびFA耐性株は後天的な遺伝子変異や染色体由来の遺伝子変異が原因であることが示唆されたが，RET耐性株の一部についてはそのメカニズムがさらに明らかにされていない。また、MRSAのMUPに対するサーベイランスを強化し、クローンの拡大による耐性化を防ぐ必要がある。

CONCLUSIONS: MUP, FA and RET exhibited highly activity against the MRSA isolates. Acquired genes and chromosome-borne genes mutations were responsible for MUP and FA resistance; however, the mechanism for some RET-resistant isolates remains to be further elucidated. Also, the surveillance to MUP in MRSA should be strengthened to prevent elevated resistance due to the expansion of clones.