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ヒト血漿、尿、乳房組織中のシリビンの定量のためのHPLC-MS/MS法の開発
Development of an HPLC-MS/MS Method for the Determination of Silybin in Human Plasma, Urine and Breast Tissue.
PMID: 32599946 DOI: 10.3390/molecules25122918.
抄録
シリビンは、乳がんをはじめとする様々ながんに対して化学予防活性を有するフラボノリグナンから抽出された物質である。本研究では、経口シリビン-ホスファチジルコリン複合体であるシリホスサプリメントを投与されている早期乳癌患者のヒト血漿、尿、乳房組織中のシリビンの定量のためのHPLC-MS/MS法を開発しました。シリビンの定量はメチル-tert-ブチルエーテル(MTBE)を用いた液液液抽出法で行い、β-グルクロニダーゼで処理することにより全シリビン濃度を定量した。内部標準物質としてナリンゲニンとナプロキセンを選択した。分析対象物の検出は、質量分析法とクロマトグラフィーで行った。HPLC-MS/MS法は、選択性、直線性、定量限界、精度と精度、キャリーオーバーの観点から評価した。この方法は、選択性、直線性、定量限界、精度、精度、キャリーオーバーの観点から評価した。今回の分析法は、我々の知る限りでは、3種類の異なる生物学的マトリックス中のミルクアザミの主要な生理活性成分を定量できる初めての分析法であり、血漿中の定量下限は0.5 ng/mLであった。シリビンホスファチジルコリンを経口摂取すると、乳房腫瘍組織に選択的に蓄積するシリビンの高血中濃度が得られます。
Silybin is a flavonolignan extracted from with chemopreventive activity against various cancers, including breast. This study was designed to develop an HPLC-MS/MS method for the determination of silybin in human plasma, urine and breast tissue in early breast cancer patients undergoing Siliphos supplementation, an oral silybin-phosphatidylcholine complex. The determination of silybin was carried out by liquid-liquid extraction with methyl-tert-butyl ether (MTBE); total silybin concentration was determined by treating the samples with β-glucuronidase, while for the determination of free silybin, the hydrolytic step was omitted. Naringenin and naproxen were selected as internal standards. The detection of the analyte was carried out by mass spectrometry and by chromatography. The HPLC-MS/MS method was evaluated in terms of selectivity, linearity, limit of quantification, precision and accuracy, and carryover. The method proved to be selective, linear, precise and accurate for the determination of silybin. To the best of our knowledge, this presents the first analytical method with the capacity to quantify the major bioactive components of milk thistle in three different biological matrices with a lower limit of quantification of 0.5 ng/mL for plasma. Silybin phosphatidylcholine, taken orally, can deliver high blood concentrations of silybin, which selectively accumulates in breast tumor tissue.