また、daf-7関連のTGF-βリガンド（Hc-tgh-2）は、Haemonchus contortusの発生に重要な役割を果たしていることが明らかになった

A daf-7-related TGF-β ligand (Hc-tgh-2) shows important regulations on the development of Haemonchus contortus.

• Li He
• Hui Liu
• Bi-Ying Zhang
• Fang-Fang Li
• Wen-Da Di
• Chun-Qun Wang
• Cai-Xian Zhou
• Lu Liu
• Ting-Ting Li
• Ting Zhang
• Rui Fang
• Min Hu

抄録

背景:

ほとんどの多細胞生物において、トランスフォーミング成長因子β（TGF-β）シグナル伝達経路は、成長と幹細胞分化の制御に関与している。これまでの研究により、寄生性線虫Haemonchus contortusにおけるTGF-β1型受容体（Hc-tgfbr1）、TGF-β2型受容体（Hc-tgfbr2）、およびCo-Smad（Hc-daf-3）を含む3つの主要分子がこの経路に重要であることが明らかになってきた。しかし、H. contortusのTGF-βリガンド(Hc-tgh-2)の機能についてはほとんど知られていない。

BACKGROUND: In most multicellular organisms, the transforming growth factor-β (TGF-β) signalling pathway is involved in regulating the growth and stem cell differentiation. Previous studies have demonstrated the importance of three key molecules in this pathway in the parasitic nematode Haemonchus contortus, including one TGF-β type I receptor (Hc-tgfbr1), one TGF-β type II receptor (Hc-tgfbr2), and one co-Smad (Hc-daf-3), which regulated the developmental transition from the free-living to the parasitic stages of this parasite. However, almost nothing is known about the function of the TGF-β ligand (Hc-tgh-2) of H. contortus.

方法:

ここでは、H. contortusの成虫雌雄におけるHc-tgh-2の8つの異なる発生段階における時間的転写プロファイルとHc-TGH-2の空間的な発現パターンを、それぞれリアルタイムPCRと免疫組織化学によって調べた。さらに、H. contortusの第3期幼虫（xL3s）から第4期幼虫（L4s）までの発生におけるHc-tgh-2の重要性を評価するために、浸漬によるRNA干渉（RNAi）を用いた。

METHODS: Here, the temporal transcription profiles of Hc-tgh-2 at eight different developmental stages and spatial expression patterns of Hc-TGH-2 in adult female and male worms of H. contortus have been examined by real-time PCR and immunohistochemistry, respectively. In addition, RNA interference (RNAi) by soaking was employed to assess the importance of Hc-tgh-2 in the development from exsheathed third-stage larvae (xL3s) to fourth-stage larvae (L4s) in H. contortus.

結果:

Hc-tgh-2はH. contortusの8つの発生段階すべてで連続的に転写されており、感染性の第3段階幼虫（iL3）で最も高レベルであり、Hc-tgh-2は体壁の筋肉、腸、成体雌の卵巣、成体雄の精巣に位置していた。Hc-tgh-2を特異的二本鎖RNA(dsRNA)でサイレンシングすると、Hc-tgh-2の転写レベルが低下し、in vitroではL4へと発達するxL3の数が減少した。

RESULTS: Hc-tgh-2 was continuously transcribed in all eight developmental stages of H. contortus studied with the highest level in the infective third-stage larvae (iL3) and Hc-TGH-2 was located in the muscle of the body wall, intestine, ovary of adult females and testes of adult males. Silencing Hc-tgh-2 by the specific double-stranded RNA (dsRNA), decreased the transcript level of Hc-tgh-2 and resulted in fewer xL3s developing to L4s in vitro.

結論:

これらの結果から、TGF-βリガンドであるHc-TGH-2は、自由行動期（L3s）から寄生期（L4s）への発生に重要な役割を果たしている可能性が示唆された。さらに、Hc-TGH-2は、H. contortus成虫の消化、吸収、宿主免疫応答、生殖発達などのプロセスにも関与している可能性がある。

CONCLUSIONS: These results suggested that the TGF-β ligand, Hc-TGH-2, could play important roles in the developmental transition from the free-living (L3s) to the parasitic stage (L4s). Furthermore, it may also take part in the processes such as digestion, absorption, host immune response and reproductive development in H. contortus adults.