スンダクラウドヒョウの精液サンプルの最初の評価と凍結保存（）

First Evaluations and Cryopreservation of Semen Samples from Sunda Clouded Leopards ().

• Zainal Zahari Zainuddin
• Mohamed Reza Mohamed Tarmizi
• Keng Chee Yap
• Pierre Comizzoli
• Symphorosa Sipangkui

抄録

スンダクラウドヒョウの生殖補助技術や系統的なバイオバンキングを開発する前に、精液の特性と凍結温度への耐性をよりよく理解することが必要である。本研究の目的は、マレーシアで飼育されている2頭のスンダクロヒョウの精液と精子の質（新鮮サンプルと凍結サンプル）を初めて評価することであった。2年間に渡って2頭のヒョウに対して、合計17回の生殖管検査（超音波検査）と電気穿刺を実施した。ヒョウ1（8歳）から得られたサンプルは、体積（402±92μL）、pH（7.9±0.9）、精子の運動性（54.5 ± 24.2％）、精子の運動性（54.5 ² 24.2％）の点で異なっていた。5±24.2％）、精子濃度（122.4±84.7×10精子/mL）、正常な形態（23.9±12.3％）、および生存率（55.2±18.2％）であった。最も一般的な構造的異常は、中間体の欠損であり、次いで尾部と頭部の欠損が異常であった。レオパード 2（精巣組織に異常のある 11 歳）のサンプルは質が低かった。レオパード 1 の凍結精液 2 サンプルを解凍し、アクロソームの完全性を調べた。解凍後のサンプルには10%未満の運動性精子が含まれていたが、50%近くの異常なアクロソームが含まれていた。この結果から、構造的に異常な精子が多いことが明らかになり、本土のクラウドリョウと同様の結果が得られた。また、数少ない生き残った精子は、体外受精や精子注入に利用できる可能性があることが示された。しかし、これらの最初の発見を検証するためには、より多くの個体を研究しなければならない。

A better understanding of semen characteristics and resilience to freezing temperatures is necessary before developing assisted reproductive techniques and systematic biobanking for the Sunda clouded leopard. The objective of this study was to evaluate for the first time the semen and sperm quality (in fresh and frozen samples) of two captive Sunda clouded leopards in Malaysia. A total of 17 examinations of the reproductive tract (using ultrasonography) and electro-ejaculations were performed on the two leopards over a 2-year period. Samples obtained from Leopard 1 (8 years old) varied in terms of volume (402 ± 92 µL), pH (7.9 ± 0.9), sperm motility (54.5 ± 24.2%), sperm concentration (122.4 ± 84.7 × 10 sperm/mL), normal morphology (23.9 ± 12.3%), and viability (55.2 ± 18.2%). Midpiece defects represented the most common structural abnormality followed by abnormal tail and head defects. Samples from Leopard 2 (11 year old with abnormal testicular tissue) were of lesser quality. Two frozen semen samples from Leopard 1 were thawed and examined for acrosome integrity. Post-thawed samples contained <10% of motile spermatozoa but almost 50% of abnormal acrosomes. The present results emphasized the high incidence of structurally-abnormal spermatozoa, similar to the mainland clouded leopard. Post-thaw evaluations showed that the few surviving spermatozoa could potentially be used for in vitro fertilization or sperm injection. However, more individuals must be studied to validate those first findings that are exciting but still preliminary.