予後バイオマーカーとしてのcirc-APBB1IPは、ERK1/2シグナル伝達経路を介して明確細胞腎癌の進行を促進する

Circ-APBB1IP as a Prognostic Biomarker Promotes Clear Cell Renal Cell Carcinoma Progression Through The ERK1/2 Signaling Pathway.

• Jierong Mo
• Yuwan Zhao
• Zhixian Ao
• Lixin Chen
• Shanhong Lin
• Wenfeng Zeng
• Haokai Wu
• Jianjun Liu

抄録

ノンコーディングRNAの一種であるcircular RNA（サーキュラーRNA）は、多くのヒトの生理・病理過程において重要な役割を果たしているが、透明細胞腎細胞がん（ccRCC）におけるその役割は明らかにされていない。本研究では、circRNAがccRCCの進行にどのような影響を及ぼすのか、またそのメカニズムを明らかにすることを目的としている。ヒトcircRNAマイクロアレイを用いて差動発現circRNAを発見し、定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（qRT-PCR）によりcircRNAの発現を確認した。circRNAの機能とメカニズムについては、細胞トランスフェクション、細胞計数キット-8、フルオレセインイソチオシアネート（FITC）アネキシンVアポトーシス検出、創傷治癒、トランスウェル、ウエスタンブロットを用いて探索した。その結果、circ-APBB1IPはccRCCで有意にアップレギュレーションされていることが示された。また、circ-APBB1IPをsiRNAでノックダウンすると、ccRCC細胞の増殖、遊走、浸潤が抑制され、アポトーシスが増加した。さらに、circ-APBB1IP をノックダウンすると、circ-APBB1IP の発現は、切断されたカスパーゼ-3、切断されたカスパーゼ-7、切断されたカスパーゼ-8、切断されたカスパーゼ-9、Bax、Bad、Bak、E-カドヘリンの発現が上昇し、Bcl-2、N-カドヘリン、MMP-2、MMP-9、p-ERK1/2 の発現が低下することが明らかになった。この結果は、circ-APBB1IPがccRCCの腫瘍形成に重要な役割を果たしていることを示唆している。これらの知見は、circ-APBB1IPがccRCCの新規バイオマーカーおよび治療標的となる可能性を示唆している。

Circular RNA (circRNA), a member of non-coding RNA, plays an essential regulatory role in many human physiological and pathological processes; however, its role in clear cell renal cell carcinoma (ccRCC) still unclear. This study aims to investigate the effect and mechanisms of circRNA on ccRCC progression. A human circRNA microarray was used to discover differential expression circRNA, and a quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) was performed to verify the expression of circRNA. The function and mechanism of circRNA were explored by cell transfection, cell counting kit-8, fluorescein isothiocyanate (FITC) Annexin V apoptosis detection, wound healing, transwell, and western blot. The result indicated that circ-APBB1IP was significantly up-regulated in ccRCC. In vitro, knockdown of circ-APBB1IP by siRNA suppressed the proliferation, migration, and invasion and increased the apoptosis of ccRCC cells. Further study found that knockdown of circ-APBB1IP up-regulated protein expression of cleaved caspase-3, cleaved caspase-7, cleaved caspase-8, cleaved caspase-9, Bax, Bad, Bak, E-cadherin and down-regulated expression of Bcl-2, N-cadherin, MMP-2, MMP-9, p-ERK1/2. Our result indicates that circ-APBB1IP has a vital function in ccRCC tumorigenesis. These findings suggest that circ-APBB1IP represents a novel potential biomarker and therapeutic target of ccRCC.

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