ロングノンコーディングRNA SNHG16はUSP22の発現を活性化し、miR-132-3pをスポンギングすることで大腸がんの進行を促進する

Long Non-Coding RNA SNHG16 Activates USP22 Expression to Promote Colorectal Cancer Progression by Sponging miR-132-3p.

• Xiaowen He
• Jun Ma
• Mingming Zhang
• Jianhua Cui
• Hao Yang

抄録

背景:

大腸がん（CRC）は、世界で最も一般的ながん関連の死亡原因です。長鎖ノンコーディングRNA（lncRNA）は、多くの癌の発生に関与している。しかし、cRCの増殖、転移、アポトーシスにlncRNA小核RNA宿主遺伝子16（SNHG16）が及ぼす影響についての研究はまだ少ない。

Background: Colorectal cancer (CRC) is the most common cause of cancer-related mortality in the world. Long non-coding RNAs (lncRNAs) are involved in the development of many cancers. However, studies on the effect of lncRNA small nucleolar RNA host gene 16 (SNHG16) on the proliferation, metastasis and apoptosis of CRC are still few.

方法:

定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（qRT-PCR）を行い、SNHG16、マイクロRNA-132-3p（miR-132-3p）およびユビキチン特異的ペプチダーゼ22（USP22）の発現量を決定した。CRC細胞の増殖、アポトーシス、遊走および浸潤は、それぞれ3-(4,5-ジメチル-2-チアゾリル)-2,5-ジフェニル-2-H-テトラゾリウムブロマイド(MTT)アッセイ、フローサイトメトリーおよびトランスウェルアッセイにより評価した。SNHG16、miR-132-3p、USP22 の相互作用を確認するために、デュアルルシフェラーゼレポーターアッセイを用いた。また、ウエスタンブロット解析により、USP22のタンパク質レベルと転移関連マーカーの評価を行った。さらに、マウスの異種移植モデルを用いて、SNHG16がin vivoでのCRC腫瘍増殖に及ぼす影響を検討した。

Methods: Quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) was performed to determine the expression levels of SNHG16, microRNA-132-3p (miR-132-3p) and ubiquitin specific peptidase 22 (USP22). The proliferation, apoptosis, migration and invasion of CRC cells were evaluated by the 3-(4,5-dimethyl-2 thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide (MTT) assay, flow cytometry and transwell assay, respectively. Dual-luciferase reporter assay was used to verify the interactions among SNHG16, miR-132-3p and USP22. Also, Western blot analysis was used to assess the protein levels of USP22 and metastasis-related markers. Moreover, mice xenograft models were used to determine the effect of SNHG16 on CRC tumor growth in vivo.

結果:

SNHG16 は CRC の組織や細胞で高発現していた。SNHG16をノックダウンすると、CRC細胞の増殖、遊走、浸潤が抑制され、アポトーシスが促進された。MiR-132-3pはSNHG16と相互作用し、その阻害剤がSNHG16の抑制効果を回復させた。また、USP22はmiR-132-3pの標的であり、その過剰発現はCRC細胞の進行に対するmiR-132-3p模倣体の抑制効果を回復させた。また、SNHG16 の発現を阻害することで、生体内での CRC 腫瘍の増殖が抑制された。

Results: SNHG16 was highly expressed in CRC tissues and cells. Knockdown of SNHG16 reduced the proliferation, migration, invasion, and promoted the apoptosis of CRC cells. MiR-132-3p could interact with SNHG16, and its inhibitor recovered the suppression effect of silenced SNHG16 on CRC cell progression. Besides, USP22 was a target of miR-132-3p, and its overexpression restored the inhibition effect of miR-132-3p mimic on CRC cell progression. In addition, interference of SNHG16 reduced CRC tumor growth in vivo.

結論:

LncRNA SNHG16はCRCの癌遺伝子として作用する可能性がある。SNHG16/miR-132-3p/USP22経路の発見は、CRC治療に新たな発想をもたらした。

Conclusion: LncRNA SNHG16 might act as an oncogene in CRC. The discovery of the SNHG16/miR-132-3p/USP22 pathway provided new thinking for the treatment of CRC.

© 2020 He et al.