口腔液中の17種類の乱用薬物の定量のための新しいLC-MS/MS確認法と実試料への適用

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Forensic Sci. Int..2020 Jul;312:110330. S0379-0738(20)30192-4. doi: 10.1016/j.forsciint.2020.110330.Epub 2020-05-12.

口腔液中の17種類の乱用薬物の定量のための新しいLC-MS/MS確認法と実試料への適用

A new LC-MS/MS confirmation method for the determination of 17 drugs of abuse in oral fluid and its application to real samples.

Elisa Bassotti
Giuseppe Maria Merone
Annachiara D'Urso
Fabio Savini
Marcello Locatelli
Angela Tartaglia
Paolo Dossetto
Cristian D'Ovidio
Ugo de Grazia

PMID: 32480284 DOI: 10.1016/j.forsciint.2020.110330.

抄録

200μLの希釈経口液(OF)から開始する17種類の薬物を1回のクロマトグラフィーランで直接分析するための新しい液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析法(LC-MS/MS)の確認方法を開発し、検証しました。コカイン、ベンゾイルコンゴニン(BEG)、コカエチレン、Δ-9-テトラヒドロカンナビノール(Δ-9-THC）、ブプレノルフィン、6-アセチルモルヒネ（6AM）、モルヒネ、コデイン、メタドン、2-エチリデン-1,5-ジメチル-3,3-ジフェニルピロリジン（EDDP）、アンフェタミン、メタアンフェタミン、3,4-メチレンジオキシメタンフェタミン（MDMA）、メチレンジオキシアンフェタミン（MDA）、3.4-メチレンジオキシ-N-エチルアンフェタミン（MDE）、ケタミン、N-メチル-1-(1,3-ベンゾジオキソール-5-イル)-2-ブタンアミン（MBDB）は、15種類の異なる内部標準物質（IS）を添加した後、サンプルの前処理を行わずに12分間のクロマトグラフィーランのみで定量した。この方法は、FDAガイドラインで要求された直線性、精度（精度と真正性）、回収率、安定性のすべての要件を満たしていました。キャリーオーバーや干渉は、マトリックス効果と同様に無視できる程度でした。LLOQはヨーロッパのガイドラインとイタリアの国内法で定義された限界値を下回っています。元の口腔内液のコレクションは、-20℃で少なくとも6ヶ月間、+4℃で1週間安定しています。

A new liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) confirmation method for the direct analysis of 17 drugs starting from 200μL of diluted oral fluid (OF), in a single chromatographic run, was developed and validated. Cocaine, benzoylecgonine (BEG), cocaethylene, Δ-9-tetrahydrocannabinol (Δ-9-THC), buprenorphine, 6-acetylmorphine (6AM), morphine, codeine, methadone, 2-ethylidene-1,5-dimethyl-3,3-diphenylpyrrolidine (EDDP), amphetamine, methamphetamine, 3,4-methylenedioxymethamphetamine (MDMA), methylenedioxyamphetamine (MDA), 3,4-Methylenedioxy-N-ethylamphetamine (MDE), ketamine, N-methyl-1-(1,3-benzodioxol-5-yl)-2-butanamine (MBDB) were determined in a chromatographic run of 12min only with no sample pre-treatment, after the addition of 15 different internal standards (ISs). The method met all requirements in terms of linearity, accuracy (precision and trueness), recovery, and stability requested by FDA guidelines. Carry-over and interferences were negligible, as well as the matrix effects. LLOQs are below the limits defined by European guidelines and Italian national laws. The original oral fluid collections are stable at least six months at -20°C and one week at +4°C.