着床窓期におけるインテグリンαVおよびβ3に対するクロルピリホスの影響

Chlorpyrifos effects on integrin alpha v and beta 3 in implantation window phase.

• Parisa Gheibi
• Zohre Eftekhari
• Delaram Doroud
• Kazem Parivar

抄録

クロルピリホス（CPF）は、世界的に農薬として使用されているが、着床窓の主役であるインテグリンαv、β3に影響を及ぼす可能性がある。そこで、本研究の目的は、着床窓期におけるインテグリンαv及びβ3に対するCPFの影響を検討することであった。30匹の雌のNMRIマウスをCPF、偽薬、対照薬の3群に分けた。6週後に各群を交尾させ、妊娠5日目に全てのマウスを安楽死させた。エストラジオールとプロゲステロンは酵素結合免疫吸着法（ELISA）で検出し、インテグリンの2つのサブユニット（αvとβ3）遺伝子と子宮内膜のタンパク質はリアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（RT-PCR）と免疫組織化学法でそれぞれ解析した。その結果、CPF群では他の群と比較して肝臓の線維化が増加した。しかし、エストラジオールとプロゲステロンはCPF群で有意に減少した。これらの結果から、CPFの効果によりインテグリンサブユニットの遺伝子発現の割合が減少したが、偽薬群のマウスでは目立った影響は見られなかった。αｖおよびβ３インテグリン蛋白質は全群で発現していたが、ＣＰＦ群では他の群に比べて濃度が低かった。この研究は、エストラジオールとプロゲステロンの減少が、CPF曝露の影響を受けたαvとβ3インテグリンの発現をダウンレギュレーションすることを示している。これらのタンパク質のパターンを変化させることは、着床の失敗に多くの影響を及ぼす可能性がある。したがって、この実験的研究は、女性の不妊の原因として認識されていないことから、殺虫剤の影響を包括的に考慮することが重要であることを示唆している。

Chlorpyrifos (CPF), as a worldwide pesticide, can effect on the integrins αv and β3 which play a main role in the implantation window. Therefore, the aim of this study was to consider CPF effects on integrin alpha v and beta 3 in implantation window phase. Thirty female NMRI mice were separated into groups of CPF, sham, and control. After 6 weeks, each group was mated, and on the 5th day of gestation, all mice were euthanized. Estradiol and progesterone levels were detected by the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) test; two subunits of integrins (αv and β3) genes and proteins of endometrium were analyzed by real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) and immunohistochemistry method, respectively. Fibrosis of the liver which evaluated by Masson's trichrome stain was increased in the CPF group compared with the others. But estradiol and progesterone levels were significantly decreased in CPF groups. Based on the findings, the proportion of genes' expressions of integrin subunits declined by the effect of CPF, while there was not any notable consequence on mice in the sham group. Alpha v and beta 3 integrin proteins expressed in all groups, but the concentration of these proteins in CPF groups was lower than in other groups. This study has shown that the decline of estradiol and progesterone downregulates the expression of αv and β3 integrins which were influenced by CPF exposure. Changing these patterns of proteins could have numerous influences on unsuccessful implantation. Therefore, this experimental study recommends that inclusive consideration of the effects of insecticides may be crucial to women's unrecognized cause of infertility.