スペインで一般的に消費されている地中海および北東大西洋の魚類に見られるアニサキス種とヒステロチラシ種。疫学的、分子的、形態学的判別分析

Anisakis and Hysterothylacium species in Mediterranean and North-East Atlantic fishes commonly consumed in Spain: Epidemiological, molecular and morphometric discriminant analysis.

• Xavier Roca-Geronès
• Matías Segovia
• Carla Godínez-González
• Roser Fisa
• Isabel Montoliu

抄録

Anisakidae（アニサキス科）の幼生ホタル線虫に寄生した生魚を摂取すると、消化器症状やアレルギー症状を引き起こすアニサキス症を引き起こす可能性がある。Anisakis属の主な原因菌は、A. simplex sensu lato (s.l.)複合体の兄弟種Anisakis simplex sensu stricto (s.s.)とA. pegreffiiであり、A. simplex sensu lato (s.l.)複合体の幼虫は、Anisakis simplex sensu stricto (s.s.)とA. pegreffii (s.l.)複合体の幼虫は、Anisakis simplex sensu lato (s.l.)複合体の幼虫は、Anisakis simplex sensu stricto (s.s.)とA. pegreffii (s.l.)複合体の幼虫である。A. simplex (s.l.)の幼虫はスペインで一般的に食されている魚から頻繁に検出されており、アレルギー反応を伴うが病原性はないと考えられているRaphidascaridididae科のHysterothylacium属の幼虫も検出されている。本報告は、スペインで一般的に消費されている3種の魚、アジ（Trachurus trachurus）（n=52）、シロギス（Micromesistius poutassou）（n=93）、カタクチイワシ（Engraulis encrasicolus）（n=69）を対象に、北東大西洋、西地中海、アドリア海で捕獲されたアスカリドイドの幼虫の疫学調査を行った結果である。解剖された魚から見つかった幼虫は、以下のように豊富な順に同定された。A. simplex (s.l.) (n=2003)、Hysterothylacium aduncum (n=422)、H. fabri (n=180)、A. physeteris (n=15)であった。二項回帰分析では、A. simplex (s.l.)とHysterothylacium幼虫の豊富さと宿主の地理的位置との間に相関関係があり、大西洋北東部が最も寄生率の高い地域であった。魚体長、魚体重、Fulton's condition factorはアジのA. simplex (s.l.)の豊富さと相関していた。北東大西洋クロホワイティングの筋肉組織にはA. simplex (s.l.)とH. aduncumの幼虫が有意に存在し、最も寄生しているのは前腹部であり、それに続いて前背部と中央部も同様に寄生していた。PCR-RFLPにより兄弟種A. simplex (s.s.)とA. pegreffiiの幼虫のITS rDNAを同定し、2値ロジスティック回帰モデルを構築して形態学的分化を検討した。その結果，Anisakis simplex (s.s.)は大西洋北東部で，A. pegreffiiは全地域で検出された．形態分析の結果，第3幼虫期と第4幼虫期（L3とL4）の2種は，RPMI-1640培地を用いたin vitro培養で得られたものであることがわかった。L3幼虫とL4幼虫では2つの識別関数が得られ，心室は両幼虫期での特異的な分化のための重要なパラメータであり，分子識別以外にも分類学的基準を提供した。本研究では，本研究対象魚の寄生性の違いを明らかにし，幼虫の筋肉組織内分布，宿主種との関連，地理的起源などを明らかにした。

The consumption of raw fish parasitized with larval ascaridoid nematodes of the family Anisakidae can cause anisakiasis, provoking gastrointestinal and/or allergic symptomatology. The main causative agents in the Anisakis genus are the sibling species Anisakis simplex sensu stricto (s.s.) and A. pegreffii of the A. simplex sensu lato (s.l.) complex. Larvae of A. simplex (s.l.) are frequently detected in fish commonly consumed in Spain, as are larvae of the genus Hysterothylacium of the family Raphidascarididae, associated with allergic reactions but not considered pathogenic. Reported here are the results of an epidemiological survey of ascaridoid larvae in three commonly consumed fish species in Spain, horse mackerel (Trachurus trachurus) (n = 52), blue whiting (Micromesistius poutassou) (n = 93) and anchovy (Engraulis encrasicolus) (n = 69), caught in the North-Eastern Atlantic, West Mediterranean and Adriatic Sea. The larvae found in the dissected fish were identified in the following order of abundance: A. simplex (s.l.) (n = 2003), Hysterothylacium aduncum (n = 422), H. fabri (n = 180) and A. physeteris (n = 15). Binomial regression analysis showed a correlation between A. simplex (s.l.) and Hysterothylacium larvae abundance and the host geographical location, the North-Eastern Atlantic being the area with the highest parasitation. Fish length and weight and Fulton's condition factor were correlated with A. simplex (s.l.) abundance only in horse mackerel. There was a significant presence of A. simplex (s.l.) and H. aduncum larvae in the musculature of North-Eastern Atlantic blue whiting, the most parasitized part being the anteroventral region, followed equally by the anterodorsal and central sections. The ITS rDNA of larvae of the sibling species A. simplex (s.s.) and A. pegreffii was identified by PCR-RFLP, and a binary logistic regression model was developed to study their morphometric differentiation. Anisakis simplex (s.s.) was detected in the North-Eastern Atlantic and A. pegreffii in all the areas studied. The morphometric analysis discriminated between the two species at the third and fourth larval stages (L3 and L4), the latter obtained by in vitro culture in RPMI-1640 medium. Two discriminant functions were obtained for the L3 and L4 larvae, the ventricle being a key parameter for specific differentiation in both stages, providing taxonomical criteria that could be used besides molecular identification. The present study reveals differences in the parasitation of the studied fish, including the distribution of larvae in the musculature, related to the host species and its geographical origin.

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