H.O.誘発HL-O2細胞に対するアメントフラボンおよび全フラボノイドのASK1/p38 MAPK経路を介した保護抗酸化効果の検討

Protective Antioxidant Effects of Amentoflavone and Total Flavonoids from Hedyotis diffusa on H O -Induced HL-O2 Cells through ASK1/p38 MAPK Pathway.

• Yun-Lan Li
• Xi Chen
• Si-Qing Niu
• Hong-Yan Zhou
• Qing-Shan Li

抄録

本研究では、Hedyotis diffusa Willd 由来の全フラボノイドおよび全トリテルペノイド酸を酢酸エチルで抽出し、HL-02 細胞の H O 誘導肝細胞障害に対するこれらのフラボノイドおよび全フラボノイドに含まれる 5 種類の化合物の肝保護活性を測定した。特に、アメントフラボンとトータルフラボノイドは、ALT、AST、LDHの漏出、SOD活性、MDA含量に影響を与えた。これらのフラボノイドは、肝毒性細胞におけるMMPの損失、Cyt Cの放出を効果的に減少させ、カスパーゼ-3/カスパーゼ-9カスケードの活性化を抑制した。また、アメントフラボンおよびフラボノイド群では、ASK1およびp-p38レベルを低下させ、チオレドキシンTrx1および還元酵素TrxR1を増加させることで、活性酸素の含有量を有意に減少させ、p38を抑制していた。これらの結果から、アメントフラボンとフラボノイドの抗酸化作用は、ASK1/p38 MAPK経路のダウンストリーミングエフェクターを阻害し、肝毒性を軽減する上で重要な役割を果たしていたTrx1とTrxR1のレベルを増加させることで、活性酸素を減少させてH O誘導の上流経路を阻害している可能性が示唆された。

In this study, total flavonoids and total triterpenoid acid were extracted with ethyl acetate from Hedyotis diffusa Willd, and hepatoprotective activities of them and five compounds from total flavonoids against H O induced hepatocyte damage on HL-02 cells were determined. In particular, amentoflavone and total flavonoids had influence on the leakage of ALT, AST, LDH, the activities of SOD and the content of MDA. They effectively reduced the loss of MMP, the release of Cyt C, and then inhibited activation of caspase-3/caspase-9 cascade in hepatotoxic cells. The contents of ROS were significantly reduced to inhibit p38 in amentoflavone and flavonoids groups which decreased ASK1 and p-p38 levels through increasing thioredoxin Trx1 and reductase TrxR1. These results suggesting that the antioxidant protection of amentoflavone and flavonoids might be reducing ROS to inhibit the H O -induced upstream of pathway via increasing levels of Trx1 and TrxR1, which were pivotal in blocking the down streaming effectors of ASK1/p38 MAPK pathway and alleviating hepatotoxicity.

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