病院排水中のアンピシリンを迅速かつ高感度に検出するための蛍光センサー支援紙ベースの競争的ラテラルフローイムノアッセイ

A Fluorescent Sensor-Assisted Paper-Based Competitive Lateral Flow Immunoassay for the Rapid and Sensitive Detection of Ampicillin in Hospital Wastewater.

• Honggui Lin
• Feixiang Fang
• Jiahui Zang
• Jianlong Su
• Qingyuan Tian
• Ranjith Kumar Kankala
• Xuexia Lin

抄録

本研究では、アンピシリン（AMP）検出のための標識機能性核酸（H-DNA）と競合蛍光ラテラルフローイムノアッセイ（CF-LFI）をベースとした簡便なアッセイ法を開発した。ここでは、AMPアプタマーと二次DNA断片を用いて、AMP検出のための可変AMPプローブを設計した。このプローブは、AMPの濃度に応じて、テストライン（Tライン）とコントロールライン（Cライン）にチューナブルなシグナルを発生させることができる。チューナブルAMPプローブを最適化することで、検出精度を向上させた。最適条件では、直線的なAMP検出濃度は10～200ng/Lの範囲であり、定量限界（LOQ）値は2.71ng/Lであり、回収率は80.5%以上であった。さらに、開発した方法は、病院排水中のAMP検出への応用が可能であることを示した。

In this study, a convenient assay method has been developed based on labeled functional nucleic acids (H-DNA) and a competitive fluorescent lateral flow immunoassay (CF-LFI) for ampicillin (AMP) detection. Herein, we designed the tunable AMP probes for AMP detection based on the AMP aptamer, and the secondary DNA fragment. The probes can generate tunable signals on the test line (T line) and control line (C line) according to the concentration of AMP. The accuracy of detection was improved by optimizing the tunable AMP probes. Under the optimal conditions, the linear concentration of AMP detection is ranged from 10 to 200 ng/L with a limit of quantitation (LOQ) value of 2.71 ng/L, and the recovery is higher than 80.5 %. Moreover, the developed method shows the potential application for AMP detection in the hospital wastewater.