コマモナス・テストステローニ（Comamonas testosteroni）の短鎖デヒドロゲナーゼ／リダクターゼ（SDRx）の特徴を明らかにした

The characterization of a short chain dehydrogenase/reductase (SDRx) in Comamonas testosteroni.

• Chuanzhi Liu
• Kai Liu
• Chunru Zhao
• Ping Gong
• Yuanhua Yu

抄録

は、体内の一連の酵素を介してステロイドホルモンを水と二酸化炭素に分解することができる研究テーマです。短鎖デヒドロゲナーゼ（SDR）は、C.C.のNAD（P）H依存性オキシドレダクターゼのクラスです。その主な機能は、ホルモンの水酸基/ケトン基の酸化還元を触媒することである。本論文では、C. ATCC11996からSDR遺伝子()をクローニングし、発現させた。ポリクローナル抗体を調製し、相同組換えにより遺伝子をノックアウトした。野生型および変異体C.は、テストステロン、エストラジオール、エストロン、エストラジオールにより誘導された。菌の増殖曲線を分光光度計で測定した。ELISAによりSDRxタンパク質の発現を確認し、高速液体クロマトグラフィー(HPLC)により各種ホルモンの含有量を検出した。その結果、テストステロンによって誘導された変異型よりも野生型の方が増殖が速いことがわかった。SDRxの濃度はテストステロン誘導下で0.318mg/mlであった。HPLCで測定した培地中のステロイドホルモン残基の変化が大きく、変異型群のテストステロン残基は野生型よりも42.4％多いことがわかった。エストロンで誘導した場合も同様である。以上のことから、この遺伝子はテストステロンとエストラジオールの分解に関与していることが明らかになった。

is a research topic that can degrade steroid hormones into water and carbon dioxide through a series of enzymes in the body. Short-chain dehydrogenase (SDR) are a class of NAD (P) H-dependent oxidoreductases in C. . Its main function is catalyzing the redox of the hydroxyl/ketone group of the hormone. In this paper, a SDR gene() is cloned from C. ATCC11996 and expressed. The polyclonal antibody was prepared and the gene knocked out by homologous recombination. Wild type and mutant C. induced by testosterone, estradiol, estrone and estriol. The growth curves of the bacteria were measured by spectrophotometer. ELISA established the expression of SDRx protein, and high-performance liquid chromatography(HPLC) detected the contents of various hormones. The results show that the growth of wild type was faster than mutant type induced by testosterone. The concentration of SDRx is 0.318 mg/ml under testosterone induction. It has a great change in steroid hormones residue in culture medium measured by HPLC: Testosterone residue in the mutant type group was 42.4 % more than the wild type in culture medium. The same thing happens with induced by estrone. In summary, this gene involved in the degradation of testosterone and estradiol, and effects the growth of .

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