猫ひっかき病の診断にPCRを使用する

[Use of PCR for diagnosing cat-scratch disease].

• Lubomíra Hozáková
• Luděk Rožnovský
• Jarmila Šímová
• Jakub Mrázek
• Vladimír Janout

抄録

目的:

血清学的に確認されたエビデンスのある猫ひっかき病の患者10人のリンパ節を摘出し、ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）によるBartonella henselaeの診断を行った。

OBJECTIVE: The diagnosis of Bartonella henselae by polymerase chain reaction (PCR) in lymph nodes removed in 10 patients with serologically confirmed evidence cat-scratch disease.

材料と方法:

2015-2018年のグループは、血清学的に猫ひっかき病が確認された10人の患者で構成され、その全員がIgG抗体陽性であり、6人の患者はB. henselaeに対するIgM抗体陽性であった。グループには、5～52歳の男性4名と女性6名、小児7名と成人3名が含まれていた。10人の患者から得られた11のリンパ節はホルマリン固定パラフィン包埋であった。肉芽腫性炎症のバリアントが9人の患者に認められた；13歳の男児にホジキンリンパ腫が認められた。DNA の単離は、cobas® DNA サンプル調製キット（Roche）を用いて行った。Bartonella spp.のDNAは，Bartonella属に特異的なgltA遺伝子を検出するBactoReal® Kit Bartonella spp. (Ingenetix)を用いたリアルタイムPCRによって検出された．

MATERIAL AND METHODS: The 2015-2018 group consisted of 10 patients with serologically confirmed cat-scratch disease, all of them having positive IgG antibodies and 6 patients also positive IgM antibodies against B. henselae. The group included 4 men and 6 women, 7 children and 3 adults, aged 5-52 years. Eleven lymph nodes obtained from the 10 patients were formalin-fixed paraffin-embedded. Variants of granulomatous inflammation were found in 9 patients; a 13-year-old boy had Hodgkin's lymphoma. DNA isolation was performed with cobas® DNA Sample Preparation Kit (Roche). DNA of Bartonella spp. was detected by real-time PCR with BactoReal® Kit Bartonella spp. (Ingenetix) detecting the gltA gene specific for the genus Bartonella.

結果:

10人の患者のうち4人は、組織学的材料をPCRで分析したところ、Bartonellaが陽性または境界線上で陽性であった。2つのリンパ節を検査した1人の患者は、1つのリンパ節のみが陽性であった。成人男性1名は陽性であったが，小児3名は境界線陽性であった．そのうち2例は化膿性肉芽腫性、他の2例は組織学的所見として壊死性化膿性肉芽腫性炎症を認めた。4人ともB. henselaeに対するIgM抗体が陽性であった。リンパ腫の少年はPCR陰性であった．

RESULTS: Four of the 10 patients tested positive or borderline positive for Bartonella when their histological material was analyzed by PCR. One patient with 2 lymph nodes examined showed a positive result for only 1 lymph node. One adult male had a positive result; three children showed borderline positive results. Of those, two patients had suppurative granulomatous and the other 2 patients had necrotizing suppurative granulomatous inflammation as histological findings. All 4 patients had positive IgM antibodies against B. henselae. The boy with lymphoma had a negative PCR result.

結論:

血清学的検査とリンパ節の組織学的検査、PCR検査を組み合わせることで、猫ひっかき病の診断が改善される可能性がある。

CONCLUSION: Serological tests combined with histological examination of lymph nodes and PCR may improve the diagnosis of cat- scratch disease.