ロングノンコーディングRNA PANDAはNF-YAと解離するがSAFAと相互作用して食道扁平上皮癌細胞の進行を促進する

Long noncoding RNA PANDA promotes esophageal squamous carcinoma cell progress by dissociating from NF-YA but interact with SAFA.

• Weihong Shi
• Qian Wang
• Yonghua Bian
• Yanxin Fan
• Yang Zhou
• Tingting Feng
• Zhouxiao Li
• Xiufeng Cao

抄録

食道扁平上皮癌（ESCC）は、特にアジアを中心とした世界的な健康問題の一つである。長いノンコーディングRNA（lncRNA）は、生物学のほぼすべての側面、特に癌の生物学において、ますます同定され、特徴づけられるようになってきている。本研究では、ESCCプロセスにおけるlncRNA PANDA（PANDA）の制御機構を探ることを目的としています。定量的リアルタイムPCR（qRT-PCR）を用いて、134人の患者と9つのESCC細胞株のがん組織と隣接する非がん組織で発現が上昇しているPANDAを検出した。ESCC 組織における PANDA の発現の増加は、KYSE180 細胞および KYSE450 細胞における MTT、EDU、コロニー形成アッセイおよびフローサイトメトリーにより、TNM 病期、進行した臨床病期、および ESCC 患者の全生存期間の短縮と関連していた。PANDAの発現を外因性にダウンレギュレーションすると、in vitroではG1-Sチェックポイントの転移を抑制することでESCC細胞の増殖とコロニー形成を有意に抑制し、in vivoでは腫瘍の発生を遅らせることができた。また、PANDAを欠失させると、E2F1、cyclinD1、cyclinD2、cyclinE1、Bcl-2の発現が低下することが、qRT-PCRおよびウエスタンブロットアッセイにより明らかになった。また、RIPでは、PANDAとNF-YAやSAFAとの相互作用が認められた。このことから、PANDA は NF-YA から離れ、NF-YA-E2F1 共制御の増殖促進遺伝子の発現を促進し、細胞のアポトーシスを抑制することが示唆されました。また、PANDA は SAFA と結合し、CyclinD1/2-Cyclin E1 および Bcl-2 経路を介して腫瘍増殖プログラムのスイッチを入れます。PANDAは、ESCCの予後を左右するバイオマーカーや治療標的として期待されています。

Esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) is one of the major global health problems, especially in Asia. Long non-coding RNAs (lncRNAs) have been increasingly identified and characterized in almost every aspect of biology, especially in cancer biology. This research desires to explore the regulatory mechanism of lncRNA PANDA (PANDA) on ESCC process. Quantitative real-time PCR (qRT-PCR) was carried out to detect the PANDA expression, which was up-regulated in matched cancerous tissues and adjacent noncancerous tissues from 134 patients and 9 ESCC cell lines. Higher expression of PANDA in ESCC tissues was associated with TNM stage, advanced clinical stage, and shorter overall survival of ESCC patients by MTT, EDU, colony formation assay and flow cytometry in KYSE180 and KYSE450 cells. Exogenous down-regulation of PANDA expression significantly suppressed ESCC cells proliferation and colony formation by arresting G1-S checkpoint transition in vitro, and retarded the development of tumors in vivo. Meanwhile, qRT-PCR and western blot assays showed that depletion of PANDA reduced E2F1, cyclinD1, cyclinD2, cyclinE1 and Bcl-2 expression. RIP showed the interaction between PANDA and NF-YA or SAFA. Our findings suggested that, PANDA drifted away from NF-YA to promote the expression of NF-YA-E2F1 co-regulated proliferation-promoting genes, and to limit the cell apoptosis. In addition, PANDA binds SAFA to switch on the tumor proliferation program through CyclinD1/2-Cyclin E1 and Bcl-2 pathways. PANDA could serve as a potential prognostic biomarker and therapeutic target for ESCC.

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