エネジン系タンパク質捕捉剤：光親和性ラベルとして作用するエネジン部位の実証

Enediyne-based protein capture agents: demonstration of an enediyne moiety acting as a photoaffinity label.

• Joyee Das
• Sayantani Roy
• Swapnil Halnor
• Amit Kumar Das
• Amit Basak

抄録

2つのエニジンベースのタンパク質捕捉化合物1と2を合成した。これらの分子はいずれも、ヒトカルボニック無水酵素II（HCA II）と可逆的に結合するためのアリールスルホンアミドと、キャプチャーイベントの可視化のためのピレン部位を有している。化合物1が光架橋剤としてのアリールアジドを有するのに対し、化合物2はアジド部位を欠いている。しかし、HCA IIを用いた捕獲実験は、HCA IIのトリプティック消化後のMALDI分析と同様にゲル電気泳動で示されるように、1と2の両方がタンパク質と光架橋することができることを示しています。この観察は、光バーグマン環化によって生成されたジラジカルの部分的に双性イオン化された一重項形に求核性アミノ酸を付加することを介して、光親和性ラベルとして機能するためにenediyneの部分の能力を実証しています。

Two enediyne based protein-capture compounds 1 and 2 were synthesized. Both these molecules have an aryl sulfonamide for reversible binding with Human Carbonic Anhydrase II (HCA II) and a pyrene moiety for the visualization of a capture event. While compound 1 has an aryl azide as a photo cross-linking agent, compound 2 lacks the azide moiety. Capture experiments with HCA II however show that both 1 and 2 can photo cross-link with the protein as indicated in gel electrophoresis as well as MALDI analysis after tryptic digestion of HCA II. This observation demonstrates the ability of the enediyne moiety to act as a photo-affinity label possibly via the addition of nucleophilic amino acids to the partially zwitterionic singlet form of the diradical generated by photo Bergman cyclization.