マウス小腸平滑筋細胞のK(+)チャネル活性に対するSKF96365の阻害効果

Inhibitory effects of SKF96365 on the activities of K(+) channels in mouse small intestinal smooth muscle cells.

• Yasuyuki Tanahashi
• Ban Wang
• Yuri Murakami
• Toshihiro Unno
• Hayato Matsuyama
• Hiroshi Nagano
• Seiichi Komori

抄録

非選択的カチオン性チャネルブロッカーであるSKF96365(SKF)のK(+)チャネル電流に対する効果を調べるために、パッチクランプ法を用いて、SKFの非存在下および存在下で、マウスの単一小腸筋細胞において、ATP感受性K(+)チャネル(IKATP)、電圧ゲーテッドK(+)チャネル(IKv)、およびCa(2+)活性化K(+)チャネル(IBK)を介した電流を記録した。SKF（10μM）は、選択的ATP感受性K(+)チャネルオープナーであるクロマカリム（10μM）によって誘導されたIKATPを可逆的に廃止した。これらの阻害効果は濃度依存的にも電圧依存的にも誘導された。50%阻害濃度(IC50)は0.85μMであり、これはムスカリン性カチオン電流について報告されているものよりも明らかに低かった。また、SKF(1μM≒IKATP抑制におけるIC50値)は、-80〜20mVの繰り返し脱分極パルスによって誘導されるIKvを可逆的に抑制した。しかし、阻害効果の程度は〜３０％に過ぎなかった。一方、SKF（1μM）は、自発的一過性IBKおよびカフェイン誘発IBKに対して有意な効果を示さなかった。これらの結果から、SKFはATP感受性K(+)チャネルと電圧依存性K(+)チャネルを阻害し、ATP感受性K(+)チャネルは電圧依存性K(+)チャネルよりも感受性が高いことが示唆された。SKF がカチオンチャネルブロッカーとして使用されるときに K(+) チャネル上のこれらの抑制効果を考慮する必要があります。

In order to investigate the effects of SKF96365 (SKF), which is a non-selective cationic channel blocker, on K(+) channel currents, we recorded currents through ATP sensitive K(+) (IKATP), voltage-gated K(+) (IKv) and Ca(2+) activated K(+) channels (IBK) in the absence and presence of SKF in single small intestinal myocytes of mice with patch-clamp techniques. SKF (10 µM) reversibly abolished IKATP that was induced by cromakalim (10 µM), which is a selective ATP sensitive K(+) channel opener. These inhibitory effects were induced in a concentration-dependent and voltage-independent manner. The 50% inhibitory concentration (IC50) was 0.85 µM, which was obviously lower than that reported for the muscarinic cationic current. In addition, SKF (1 µM ≈ the IC50 value in IKATP suppression) reversibly inhibited the IKv that was induced by repetitive depolarizing pulses from -80 to 20 mV. However, the extent of the inhibitory effects was only ~30%. In contrast, SKF (1 µM) had no significant effects on spontaneous transient IBK and caffeine-induced IBK. These results indicated that SKF inhibited ATP sensitive K(+) channels and voltage-gated K(+) channels, with the ATP sensitive K(+) channels being more sensitive than the voltage-gated K(+) channels. These inhibitory effects on K(+) channels should be considered when SKF is used as a cationic channel blocker.