AAMPはRhoA/Rhoキナーゼシグナル伝達を介して内皮細胞の移動と血管新生を制御している

AAMP Regulates Endothelial Cell Migration and Angiogenesis Through RhoA/Rho Kinase Signaling.

• Jianjun Hu
• Juhui Qiu
• Yiming Zheng
• Tao Zhang
• Tieying Yin
• Xiang Xie
• Guixue Wang

抄録

血管新生は、内皮細胞の増殖、遊走、管形成を含む複雑なプロセスである。AAMPは複数の細胞種の細胞遊走を調節する役割を担っている。本研究の目的は、AAMPが血管新生を制御しているかどうかを調べ、VEGF誘導血管新生におけるAAMPの役割を明らかにすることであった。その結果、AAMPは複数の細胞型で発現し、主に血管内皮細胞の細胞質と膜に局在していることが明らかになった。その結果、AAMP の siRNA によるノックダウンおよび抗体による阻害は、VEGF 誘導血管内皮細胞のチューブ形成および大動脈リングの血管新生を阻害することがわかった。メカニズム研究の結果、AAMPの発現はVEGFによって濃度および時間依存的に有意に上昇することが示された。さらに、VEGFはAAMPを細胞膜突起にリクルートした。AAMPは血管内皮細胞の広がりと移動を媒介することで血管新生を調節している。AAMPをノックダウンすると、VEGFが誘導するアクチンストレス線維やコラーゲンゲルの収縮が減少した。さらに、血管内皮細胞の遊走と血管新生を制御するAAMPの作用に寄与する重要な因子として、RhoA/Rhoキナーゼシグナル伝達を同定した。これらのデータは、血管新生におけるAAMPの重要な役割を示しており、AAMPを阻害することが血管新生関連疾患の治療戦略になる可能性を示唆しています。

Angiogenesis is a complicated process including endothelial cell proliferation, migration and tube formation. AAMP plays a role in regulating cell migration of multiple cell types. The purpose of this study was to investigate whether AAMP regulates angiogenesis, and to clarify the role of AAMP in the VEGF-induced angiogenesis. We found that AAMP expressed in multiple cell types and mainly localized in cytoplasm and membrane in vascular endothelial cells. Using tube formation assay in vitro and aortic ring assay, siRNA-mediated knockdown and antibody blockade of AAMP impaired VEGF-induced endothelial cell tube formation and aortic ring angiogenic sprouting. Mechanistic studies showed that AAMP expression was significantly upregulated by VEGF in a concentration and time-dependent manner. Moreover, VEGF recruited AAMP to the cell membrane protrusions. AAMP regulates angiogenesis by mediating the spreading and migration of vascular endothelial cells. AAMP knock-down reduced VEGF-induced actin stress fibers and collagen gel contraction. Furthermore, we identified RhoA/Rho kinase signaling as an important factor that contributes to the action of AAMP in regulating endothelial cell migration and angiogenesis. Altogether, these data demonstrated the critical role of AAMP in angiogenesis and suggested blocking AAMP could serve as a potential therapeutic strategy for angiogenesis-related diseases.