ジアジリン光架橋とクリックケミストリーによる標的同定

Target Identification by Diazirine Photo-Cross-linking and Click Chemistry.

• Andrew L Mackinnon
• Jack Taunton

抄録

生物学的に活性な低分子の標的同定は、しばしば前方の化学遺伝学における速度を決定するステップとなります。光親和性標識（PAL）は、複雑なタンパク質混合物における標的同定のための有用な生化学的戦略を表しています。このユニットでは、アルキルジアジリンをベースとした光親和性プローブとCu(I)触媒によるクリックケミストリーを用いて、生物学的に活性な低分子の標的を共有結合的に標識し、可視化する方法について説明します。また、タンパク質標的の同定に有用なプローブ修飾タンパク質の親和性精製のための一般的な方法も記載されています。

Target identification of biologically active small-molecules is often the rate-determining step in forward chemical genetics. Photo-affinity labeling (PAL) represents a useful biochemical strategy for target identification in complex protein mixtures. This unit describes the use of alkyl diazirine-based photo-affinity probes and Cu(I)-catalyzed click chemistry to covalently label and visualize the targets of biologically active small-molecules. A general method for affinity purification of probe-modified proteins, useful for identification of protein targets, is also described.