グルタチオンとBcl-2の標的化は、bcl-xl、bcl-2、およびmcl-1を過剰発現するヒトA375メラノーマ異種移植片の化学放射線療法による排除を促進する

Glutathione and Bcl-2 targeting facilitates elimination by chemoradiotherapy of human A375 melanoma xenografts overexpressing bcl-xl, bcl-2, and mcl-1.

• Salvador Mena
• María L Rodriguez
• Angel Ortega
• Sonia Priego
• Elena Obrador
• Miguel Asensi
• Ignacio Petschen
• Miguel Cerdá
• Bob D Brown
• José M Estrela

抄録

背景:

Bcl-2はメラノーマの化学抵抗性に寄与すると考えられている。しかし、Bcl-2関連タンパク質の発現はメラノーマによって異なる可能性があります。そこで、Bcl-2関連タンパク質の発現とin vivoでのメラノーマの進行や併用療法に対する抵抗性との相関を調べました。

BACKGROUND: Bcl-2 is believed to contribute to melanoma chemoresistance. However, expression of Bcl-2 proteins may be different among melanomas. Thus correlations among expression of Bcl-2-related proteins and in vivo melanoma progression, and resistance to combination therapies, was investigated.

方法:

免疫不全のヌードマウスにヒトA375メラノーマをs.c.注入した。レーザーマイクロダイセクションにより得られた腫瘍サンプルを用いて、タンパク質の発現を調べた。siRNAのトランスフェクションや異所性過剰発現は、メラノーマの進行中に優先的にアップレギュレーションまたはダウンレギュレーションされるタンパク質を操作するために適用されました。抗bcl-2アンチセンスオリゴヌクレオチドと化学放射線療法（グルタチオン消去剤、パクリタキセルタンパク結合粒子、ダウノルビシン、X線）を併用した。

METHODS: Human A375 melanoma was injected s.c. into immunodeficient nude mice. Protein expression was studied in tumor samples obtained by laser microdisection. Transfection of siRNA or ectopic overexpression were applied to manipulate proteins which are up- or down-regulated, preferentially, during melanoma progression. Anti-bcl-2 antisense oligonucleotides and chemoradiotherapy (glutathione-depleting agents, paclitaxel protein-binding particles, daunorubicin, X rays) were administered in combination.

結果:

In vivoでは、A375細胞はプロアポトーシスbaxの発現をダウンレギュレートし、抗アポトーシスbcl-2、bcl-xl、およびmcl-1をアップレギュレートしたが、Bcl-2のみがin vivoでの長期的な腫瘍細胞の生存と進行に重要であると思われた。Bcl-2の減少は、部分的な治療と組み合わせて、メラノーマの増殖を減少させた。しかし、Bcl-2を標的とした化学放射線療法の完全な組み合わせのみがA375メラノーマを根絶し、80％のマウスで再発を伴わない長期生存（120日以上）をもたらした。腫瘍の退縮は免疫刺激によるものではなかった。血液学的および臨床化学的データは、臨床的に認められた毒性の範囲内であった。

RESULTS: In vivo A375 cells down-regulated pro-apoptotic bax expression; and up-regulated anti-apoptotic bcl-2, bcl-xl, and mcl-1, however only Bcl-2 appeared critical for long-term tumor cell survival and progression in vivo. Reduction of Bcl-2, combined with partial therapies, decreased melanoma growth. But only Bcl-2 targeting plus the full combination of chemoradiotherapy eradicated A375 melanoma, and led to long-term survival (> 120 days) without recurrence in 80% of mice. Tumor regression was not due to immune stimulation. Hematology and clinical chemistry data were within accepted clinical toxicities.

結論:

Bcl-2を標的とする戦略は、Bcl-2および他のBcl-2関連の抗アポトーシスタンパク質を過剰発現しているメラノーマに対する抗腫瘍療法の有効性を高める可能性があります。

CONCLUSION: Strategies to target Bcl-2, may increase the effectiveness of antitumor therapies against melanomas overexpressing Bcl-2 and likely other Bcl-2-related antiapoptotic proteins.

© 2012 Mena et al; licensee BioMed Central Ltd.