アドリアマイシン腎症ラットにおけるポッドサイト傷害に対するエプレレノンの保護効果

Protective effects of eplerenone on podocyte injury in adriamycin nephropathy rats.

• Zhan Fang
• Chun Zhang
• Fangfang He
• Shan Chen
• Xifeng Sun
• Zhonghua Zhu
• Jianshe Liu
• Xianfang Meng

抄録

アドリアマイシン誘発性腎障害に対するエプレレノンの保護効果および関与する可能性のあるメカニズムを調べるために、36匹の雄性Sprague-Dawleyラットを対照群、アドリアマイシン腎症（AN）群、およびエプレレノン処理群（100mg-kg（-1）-d（-1）エプレレノン）に無作為に分けた。アドリアマイシン注射（6.5mg/kgアドリアマイシンのシングルテール静脈内注射）の28日後に血圧、24時間尿蛋白、血清カリウム、ナトリウム、クレアチニンを測定した。腎組織の形態学的変化を光顕微鏡および電子顕微鏡で観察した。免疫組織化学およびウェスタンブロッティングを行い、腎皮質におけるTGF-β(1)およびデスミンの発現を調べた。その結果、アドリアマイシン投与28日後の3群のラットでは、血清カリウム、ナトリウム、クレアチニン濃度、血圧値に有意な変化は認められなかった。一方、24時間蛋白尿排泄量は、AN群では対照群に比べて有意に高かったが（P＜0.01）、エプレレノン処理群ではAN群に比べて有意に減少した（P＜0.05）。AN群では、中膜細胞の軽度な増殖とマトリックスの拡大、ポッドサイトの拡散性変形と足部突起の合流が認められた。対照的に、エプレレノン処理群のラットでは、これらの形態学的病変は明らかに減少していた。また、TGF-β(1)とdesminのタンパク質発現は、AN群では対照群と比較して有意に上昇していた（P<0.01）が、エプレレノン処理群ではAN群と比較して有意に低下していた（P<0.05）。以上のことから，エプレレノンはサイトカインの放出抑制を介してアドリアマイシン誘発性腎症の蛋白尿や病的変化の発現を改善し，血圧降下作用とは無関係にpodocytesの形態を回復させる可能性があると結論づけられた。

To investigate the protective effects of eplerenone on adriamycin-induced renal injury and the possible mechanisms involved, 36 male Sprague-Dawley rats were randomly divided into control group, adriamycin nephropathy (AN) group and eplerenone-treated group (100 mg·kg(-1)·d(-1) eplerenone). Blood pressure, 24-h urinary protein, serum potassium, sodium and creatinine were measured 28 days after adriamycin injection (a single tail intravenous injection of 6.5 mg/kg adriamycin). The morphological changes of renal tissues were observed by light and electron microscopy. Immunohistochemistry and Western blotting were performed to examine the expression of TGF-β(1) and desmin in renal cortex. The results showed that 28 days after adriamycin injection, there were no significant changes in the level of serum potassium, sodium, creatinine concentrations and blood pressure values in the rats of the three groups. Meanwhile, the 24-h proteinuria excretion in the AN group was significantly higher than that in the control group (P<0.01), but that in the eplerenone-treated group was substantially reduced when compared with that in the AN group (P<0.05). Mild mesangial cell proliferation and matrix expansion, diffuse deformation and confluence of foot processes in podocytes were found in the AN group. By contrast, rats in the eplerenone-treated group exhibited obvious attenuation of these morphological lesions. The protein expression of TGF-β(1) and desmin in the AN group was markedly up-regulated in contrast to that in the control group (P<0.01), whereas that in the eplerenone-treated group was much lower than in the AN group (P<0.05). It was concluded that eplerenone may ameliorate the proteinuria and the development of pathological alteration in adriamycin-induced nephropathy presumably via the inhibition of cytokine release, and restore the morphology of podocytes independent of its blood pressure-lowing effects.