緑茶カテキンによるアデノウイルス感染およびアデナインの阻害

Inhibition of adenovirus infection and adenain by green tea catechins.

抄録

緑茶カテキンは、がんの転移やインフルエンザウイルス、HIVの感染に関与するプロテアーゼを阻害することが報告されている。現在までのところ、有効な抗アデノウイルス療法はない。そこで我々は、緑茶カテキン、特に主成分であるエピガロカテキン-3-ガレート（EGCG）のアデノウイルス感染およびウイルスプロテアーゼであるアデナインに対する効果を細胞培養で検討した。感染細胞の培地にEGCG（100μM）を添加すると、ウイルス収量が2桁減少し、Hep2細胞におけるIC（50）は25μM、治療指数は22であった。この薬剤は、ウイルス感染の初期段階から後期段階への移行期に細胞に添加した場合に最も効果的であったことから、EGCGはウイルス感染の1つ以上の後期段階を阻害することが示唆された。感染性ウイルスの力価や物理的粒子の産生は、ウイルスタンパク質の合成よりもはるかに大きな影響を受けたことから、これらのステップのひとつはウイルスの集合体であると思われる。もう一つの段階は、アデナインによって行われる成熟切断かもしれない。アデナインについて試験した4種類のカテキンのうち、EGCGはIC(50)が109μMと最も阻害的であったのに対し、標準的なシステインプロテアーゼ阻害剤であるPCMBのIC(50)は714μMであった。EGCGと異なる緑茶は、精製したアデノウイルスをそれぞれ250と245-3095のIC(50)で不活化した。我々は、EGCGの抗アデノウイルス活性は、細胞外と細胞内の両方で、いくつかのメカニズムを通して発現するが、緑茶飲用者の血清で報告されているよりもはるかに高い有効薬物濃度で発現すると結論づけた。

Green tea catechins have been reported to inhibit proteases involved in cancer metastasis and infection by influenza virus and HIV. To date there are no effective anti-adenoviral therapies. Consequently, we studied the effect of green tea catechins, and particularly the predominant component, epigallocatechin-3-gallate (EGCG), on adenovirus infection and the viral protease adenain, in cell culture. Adding EGCG (100 microM) to the medium of infected cells reduced virus yield by two orders of magnitude, giving and IC(50) of 25 microM and a therapeutic index of 22 in Hep2 cells. The agent was the most effective when added to the cells during the transition from the early to the late phase of viral infection suggesting that EGCG inhibits one or more late steps in virus infection. One of these steps appears to be virus assembly because the titer of infectious virus and the production of physical particles was much more affected than the synthesis of virus proteins. Another step might be the maturation cleavages carried out by adenain. Of the four catechins tested on adenain, EGCG was the most inhibitory with an IC(50) of 109 microM, compared with an IC(50) of 714 microM for PCMB, a standard cysteine protease inhibitor. EGCG and different green teas inactivated purified adenovirions with IC(50) of 250 and 245-3095, respectively. We conclude that the anti-adenoviral activity of EGCG manifests itself through several mechanisms, both outside and inside the cell, but at effective drug concentrations well above that reported in the serum of green tea drinkers.