誘導性核タンパク質の免疫細胞化学のマッピングと定量分析のための自動化システム

An automated system for the mapping and quantitative analysis of immunocytochemistry of an inducible nuclear protein.

• G A Cecchi
• S Ribeiro
• C V Mello
• M O Magnasco

抄録

我々はここで、誘導性核タンパク質の免疫細胞化学によって染色された組織切片を正確にマッピングする自動化システムについて説明します。切片は、CCDカメラにフックされたコンピュータ制御の顕微鏡セットアップを使用してスキャンされます。高解像度で撮影された生の画像は、ラベル化された細胞核の認識のための高度に選択的な基準を使用してフィルタリングされます。認識された標識核の総集団は、標識強度に応じて別々のビンに分割されます。最後に、ラベル化された核の位置とラベル化強度の両方に関する情報は、平均密度マップで表されます。このシステムは、歌による刺激に応答して、歌鳥の脳内で誘導性遺伝子ZENKを発現する神経細胞の定量的マッピングに最適化されているが、誘導性核タンパク質のマッピングには一般的な適用が可能であると思われる。

We describe here an automated system that accurately maps tissue sections stained by immunocytochemistry for an inducible nuclear protein. The sections are scanned with a computer-controlled microscope setup hooked to a CCD camera. Raw images captured at high resolution are filtered using highly selective criteria for the recognition of labeled cell nuclei. The total population of recognized labeled nuclei is then divided into separate bins, according to their labeling intensities. Finally, information about both the position and labeling intensity of labeled nuclei is represented in average density maps. The system was optimized for the quantitative mapping of neuronal cells expressing the inducible gene ZENK in the brain of songbirds, in response to stimulation with song, but should be of general applicability for the mapping of inducible nuclear proteins.