CAL 27、HepG2、Caco-2細胞株に対するStrawberry Tree ( L.) Honey、その抽出物、Homogentisic acidの細胞毒性活性について

Cytotoxic activity of strawberry tree ( L.) honey, its extract, and homogentisic acid on CAL 27, HepG2, and Caco-2 cell lines.

抄録

ストロベリーツリー（L.）ハニー（STH）は、「ビターハニー」とも呼ばれ、地中海沿岸地域で広く使用されている伝統薬です。地理的な起源に関係なく、通常、非常に高いフェノール化合物の含有量と強い抗酸化力を有しています。しかし、STH、そのフェノール抽出物（STHE）、およびその主な生理活性化合物であるホモゲンチジン酸（HGA）の細胞レベルでの効果については、まだほとんど知られていない。本研究の目的は、クロアチア産STHの総フェノール量、DPPHラジカル消去活性、第二鉄還元抗酸化力を推定し、舌扁平上皮癌（CAL27）、肝細胞癌（HepG2）、上皮性大腸腺癌細胞（Caco2）の3つのヒト細胞株に対するSTH、STHE、HGAの細胞毒性と酸化促進効果を調べることにある。これらの物質を4つの濃度（STHのヒト1日平均摂取量0.5～5倍）で、30分および1、2時間にわたって試験したところ、クロアチア産STHの総フェノール量はハチミツ1kgあたり没食子酸当量（GAE）1.67g、DPPHラジカル消去活性は1kgあたりトロックス当量（TE）2.96mmol、鉄還元抗酸化力（FRAP）は1kgあたり鉄13.5mmolでした。その結果、いずれの細胞株においても、明確で一貫した時間または濃度依存性のある細胞毒性は認められなかった。ほぼすべての暴露時間において、3つの細胞タイプすべてにおいて、ROSレベルはコントロールより有意に高くはなかった。最も重要な観察は、試験物質が濃度に関係なく、低い細胞毒性と高い生体適合性を持つということであり、これは他のモデルにおける生物学的効果のさらなる研究のための良い出発点である。

Strawberry tree ( L.) honey (STH), also known as "bitter honey", is a traditional medicine widely used in the Mediterranean area. Regardless of geographical origin, it usually has a very high content of phenolic compounds and strong antioxidant capacity. Yet, little is still known about the effects of STH, its phenolic extract (STHE), and its main bioactive compound - homogentisic acid (HGA) - at the cell level. The aim of this study was to estimate total phenolic content, DPPH radical scavenging activity, and ferric reducing antioxidant power of STH made in Croatia and investigate cytotoxic and pro-oxidative effects of STH, STHE and HGA on three human cell lines: tongue squamous cell carcinoma (CAL 27), hepatocellular carcinoma (HepG2), and epithelial colorectal adenocarcinoma cells (Caco-2) cells. These substances were tested at four concentrations (0.5-5× average human daily intake of STH) and over 30 min and 1 and 2 h. Croatian STH had a total phenolic content of 1.67 g gallic acid equivalents (GAE) per kg of honey, DPPH radical scavenging activity of 2.96 mmol Trolox equivalents (TE) per kg of honey, and ferric reducing antioxidant power (FRAP) of 13.5 mmol Fe per kg of honey. Our results show no clear and consistent time- or concentration-dependent cytotoxicity in any of the cell lines. ROS levels in all the three cell types at almost all exposure times were not significantly higher than control. The most important observation is that the tested substances have low cytotoxicity and high biocompatibility, regardless of concentration, which is a good starting point for further research of their biological effects in other models.

Med obične planike ( L.) (STH), poznat kao "gorki med", tradicionalno se koristi u narodnoj medicini na sredozemnom području.そのため、抗コクシジウム作用のある薬剤を使用する必要があります。また、STH-a、STHE、HGAの3種類のフェノロール系抗菌薬について、その有効性を検証しています。また、このバイオテクノロジーには、ウクライナ産フェノーラ、抗酸菌測定法DPPHおよびFRAP、ウクライナ産プロバイオティクス、クエン酸の測定などが含まれています。STH-a、STHE-a、HGA-eの3種類のがん種に対応した、プロキシダクティビクス：肝細胞癌（CAL 27）、肝細胞癌（HepG2）、アデノ癌（Caco-2）の3つの判定基準で、STH-a、STHE-a、HGA-eの3つの判定基準を設定しました。STH、STHE、HGAの測定は、コンセントレータ（0.5～5×プロジェクタ）を使用し、30分ごとに測定する。HrvatskiのSTHは、1kgあたり1,67gのエキストリンと13,5mmolのFeを含む抗コクシジウム剤で構成されています。また、この結果は、日本人の生活習慣病予防に役立つものであり、日本人の生活習慣病予防に役立つものではありません。このような状況下で、私たちは、このような問題を解決するために、様々な方法を模索しています。このような場合、"ispitivane tvari imaju nisku citotoksičnost i visoku biokompatibilnost, bez obzira na koncentraciju, š "となります。薬物モデルにおける生物学的性質の解明を目的としたポラズナ・トーチカを開発しました。

Med obične planike ( L.) (STH), poznat kao “gorki med”, tradicionalno se koristi u narodnoj medicini na sredozemnom području. Bez obzira na zemljopisno podrijetlo, obično ima vrlo visok udio fenolnih spojeva i snažan antioksidacijski kapacitet. Ipak, još uvijek se malo zna o učincima STH-a, njegova ekstrakta (STHE), kao i dominantnoga fenolnog spoja – homogentizinske kiseline (HGA) – na staničnoj razini. Cilj ovoga istraživanja bio je utvrditi ukupni sadržaj fenola, antioksidacijski kapacitet metodom DPPH i FRAP u STH-u, proizvedenome u Hrvatskoj, te ispitati citotoksične i prooksidacijske učinke STH-a, STHE-a i HGA-e na tri ljudske stanične linije: karcinoma pločastih stanica jezika (CAL 27), hepatocelularnoga karcinoma jetre (HepG2) i adenokarcinoma epitela debelog crijeva (Caco-2). STH, STHE i HGA ispitani su u četirima koncentracijama (0,5–5× prosječni dnevni unos STH-a u ljudi) i tijekom 30 minuta te tijekom jednog i dva sata. Hrvatski STH imao je visok ukupan sadržaj fenola (1,67 g ekvivalenata galne kiseline po kg meda i snažan antioksidacijski kapacitet (2,96 mmol Trolox ekvivalenata po kg meda i 13,5 mmol Fe po kg meda). Dobiveni rezultati ne pokazuju jasnu i dosljednu citotoksičnost, ovisno o vremenu ili koncentraciji, ni u jednoj staničnoj liniji. Razine reaktivnih kisikovih vrsta u svim trima tipovima stanica u gotovo svim vremenima izlaganja nisu bile značajno veće od kontrole. Najvažnije je zapažanje da ispitivane tvari imaju nisku citotoksičnost i visoku biokompatibilnost, bez obzira na koncentraciju, što je dobra polazna točka za daljnja istraživanja njihovih bioloških učinaka na drugim modelima.