SARS-CoV-2に対する各種うがい薬製剤と食塩水の有効性

The effectiveness of various gargle formulations and salt water against SARS-CoV-2.

抄録

COVID-19は、感染率が高く、潜伏期間も5〜14日と長いため封じ込めが難しい。さらに、感染者の半数以上が若年層で無症状であった。無症候性患者を介したウイルス感染は、疾患封じ込めの大きな課題となっています。治療法が限られているため、予防対策が病気の蔓延を抑制する上で大きな役割を果たします。消毒剤によるうがいは、のどのウイルスを除去するのに有効である可能性があります。SARS-CoV-2に対する4種類の市販洗口液/うがい薬製剤について、清浄な状態（0.3g/l BSA）と汚れた状態（0.3g/l BSA+3mL/L human erythrocytes）の両方で、時間点30と60の時点で殺ウイルス活性をテストした。ウイルスを分離し、Vero E6細胞で増殖させた。Vero E6に対する本製品の細胞毒性は、欧州規格EN14476:2013/FprA1:2015プロトコルに基づくkill time assayで評価しました。ウイルス力価は、Spearman-Karber法を用いて50%組織培養感染量（TCID50/mL）として算出した。4 logのウイルス力価の低下は、99.99%以上の不活性化に相当する。cetylperidinium chloride，chlorhexidine，hexitidineを用いた製剤は，清潔な環境と汚れた環境の両方で30秒以内に曝露した場合，4 log10以上のウイルス価の減少を達成した。チモール製剤は0.5 logの減少にとどまった。また、塩水での効果は確認されなかった。塩化セチルペリジニウム，クロルヘキシジン，ヘキセチジンを用いたうがい薬は，SAR-CoV-2の体内侵入経路での低減，すなわちCOVID-19の感染リスクの最小化に大きな可能性を持っていると考えられる。

The COVID-19 is difficult to contain due to its high transmissibility rate and a long incubation period of 5 to 14 days. Moreover, more than half of the infected patients were young and asymptomatic. Virus transmission through asymptomatic patients is a major challenge to disease containment. Due to limited treatment options, preventive measures play major role in controlling the disease spread. Gargling with antiseptic formulation may have potential role in eliminating the virus in the throat. Four commercially available mouthwash/gargle formulations were tested for virucidal activity against SARS-CoV-2 in both clean (0.3 g/l BSA) and dirty (0.3 g/l BSA + 3 mL/L human erythrocytes) conditions at time points 30 and 60 s. The virus was isolated and propagated in Vero E6 cells. The cytotoxicity of the products to the Vero E6 was evaluated by kill time assay based on the European Standard EN14476:2013/FprA1:2015 protocol. Virus titres were calculated as 50% tissue culture infectious dose (TCID50/mL) using the Spearman-Karber method. A reduction in virus titer of 4 log corresponds to an inactivation of ≥ 99.99%. Formulations with cetylperidinium chloride, chlorhexidine and hexitidine achieved > 4 log10 reduction in viral titres when exposed within 30 s under both clean and dirty conditions. Thymol formulations achieved only 0.5 log reduction in viral titres. In addition, salt water was not proven effective. Gargle formulations with cetylperidinium chloride, chlorhexidine and hexetidine have great potential in reducing SAR-CoV-2 at the source of entry into the body, thus minimizing risk of transmission of COVID-19.