歯の間葉系幹細胞の生存率に対する各種歯内療法用灌注液の細胞毒性の影響

The cytotoxic effects of various endodontic irrigants on the viability of dental mesenchymal stem cells.

抄録

本研究では，再生歯内療法（RET）に用いられる各種灌流液の間葉系幹細胞に対する細胞毒性を評価し，さらに次亜塩素酸（HOCl）の細胞生存率とアルカリホスファターゼ（ALP）活性に対する長期的な影響を検討することを目的とした．幹細胞は、さまざまな濃度のNaOCl、EDTA、クロルヘキシジン（CHX）、エチドロン酸（HEDP）／NaOClの組み合わせ、およびHOClにさらされました。HOClは、21日までのALP活性への影響を調べました。さらに、細胞の生存率をカルセインAMを用いて蛍光測定した。最も細胞毒性の高い洗浄剤は，最も低い濃度でもCHXであった。NaOClおよびHEDP/NaOClの1:100希釈液は、細胞生存率を約40%まで低下させた。HOClは、試験したすべての洗浄剤の中で最も低い細胞毒性を示した。また、HOClはコントロールと比較して、ALP活性の有意な低下を示さなかった。歯内療法用洗浄剤の細胞毒性は、時間および濃度に依存していた。RETsは宿主幹細胞の生存を必要とするため、HOClは生存率とALP活性に関して有望な結果を示した。

This study aimed to evaluate cytotoxic effects of various irrigation solutions used in regenerative endodontic treatments (RETs) on mesenchymal stem cells, and further examine the long-term effect of hypochlorous acid (HOCl) on the cell viability and alkaline phosphatase (ALP) activity. Stem cells were exposed to various concentrations of NaOCl, EDTA, chlorhexidine (CHX), etidronic acid (HEDP)/NaOCl combination and HOCl. HOCl was tested for its effects on ALP activity up to 21 days. Additionally, cell viability was measured fluorescently using calcein AM. The most cytotoxic irrigant was CHX even with the lowest concentration. NaOCl and HEDP/NaOCl with 1:100 dilution decreased viability to around 40%. HOCl showed the lowest cytotoxicity among all tested irrigants. HOCl also showed no significant reduction in ALP activity compared with the controls. The cytotoxicity of endodontic irrigants was time and concentration dependent. HOCl demonstrated promising results regarding viability and ALP activity, since RETs require host stem cell survival.