再生歯内療法における革新的な薬剤と現在使用されている歯内療法剤の抗菌効果と生物活性について

Antibacterial Effect and Bioactivity of Innovative and Currently Used Intracanal Medicaments in Regenerative Endodontics.

抄録

序論:

本研究の目的は，triple antibiotic paste（TAP），水酸化カルシウム（Ca[OH]）および次亜塩素酸カルシウム（Ca[OCL]）の抗菌効果と生物活性を明らかにすることである。

INTRODUCTION: The purpose of this study was to determine the antibacterial effect and bioactivity of triple antibiotic paste (TAP), calcium hydroxide (Ca[OH]), and calcium hypochlorite (Ca[OCl]).

方法:

3週齢のEnterococcus faecalisバイオフィルムを根管に感染させた後、TAP、Ca(OH)、Ca(OCL)を7日間投薬した（n=10/群）。ポジティブおよびネガティブコントロールとして、未処理および未感染の歯冠を用いた。抗菌効果は、コロニー形成単位とLive/Dead bacterial viability kitを用いて測定した。歯髄幹細胞を薬用象牙質表面に7日間播種した。また，細胞播種前にCa(OCL)で処理した試料を中和するために，チオ硫酸ナトリウムと様々な濃度のアスコルビン酸（1％，5％，10％）を使用した（n=3のトリプリケートで実施）。細胞の生存率と形態は，生存率アッセイとLive/Dead cell analysisを用いて評価した。また，アルカリホスファターゼ（ALP）活性を測定し，細胞のミネラル化活性を調べた。

METHODS: Root canals were infected with 3-week-old Enterococcus faecalis biofilm and then medicated for 7 days with TAP, Ca(OH), or Ca(OCl) (n = 10/group). Untreated and uninfected canals were used as positive and negative controls. The antibacterial effect was determined using colony-forming units and a Live/Dead bacterial viability kit. Dental pulp stem cells were seeded on medicated dentin surfaces for 7 days. Sodium thiosulfate and various concentrations of ascorbic acid (1%, 5%, and 10%) were also used to neutralize the samples treated with Ca(OCl) before cell seeding (n = 3 in triplicate). Cell viability and morphology were evaluated using a viability assay and Live/Dead cell analysis. Alkaline phosphatase (ALP) activity was also measured to determine the cells' mineralization activity.

結果:

すべての薬剤は，初期の細菌量を減少させた（P<.05）。主管と象牙細管で最も細菌が減少したのは、Ca(OCL)投与群であった（P<.05）。TAP処理およびCa(OH)処理した象牙質表面は、未処理の象牙質表面と比較して、細胞生存率およびALP活性が向上した（P<.05）。一方、Ca(OCL)処理した象牙質表面は、細胞生存率およびALP活性が低下した（P<.05）。10%のアスコルビン酸は，処理した象牙質表面のCa(OCL)の影響を中和し，未処理の象牙質表面や他のグループと比較して高い細胞生存率（P<.05）と同等のALP活性を示した（P>.05）．

RESULTS: All medicaments decreased the initial bacterial load (P < .05). The highest bacterial reduction in the main canal and dentinal tubules was observed in the Ca(OCl) group (P < .05). TAP- or Ca(OH)-treated dentin surface improved cell viability and ALP activity compared with the untreated dentin surface (P < .05), whereas Ca(OCl) decreased cell viability and ALP activity (P < .05). Ten percent ascorbic acid neutralized the effect of Ca(OCl) on the treated dentin surface, showing higher cell viability (P < .05) and similar ALP activity with the untreated dentin surface and the other groups (P > .05).

おわりに:

Ca(OCL)投薬は、TAPおよびCa(OH)投薬と比較して、E. faecalisのバイオフィルムに対する根管消毒効果を向上させた。Ca(OCL)による細胞生存率やミネラル化活性への悪影響は，10％アスコルビン酸で中和できる。

CONCLUSIONS: Ca(OCl) medication improved root canal disinfection against E. faecalis biofilm compared with TAP and Ca(OH). The adverse effects caused by Ca(OCl) on cell viability and mineralization activity can be neutralized with 10% ascorbic acid.