ファブリー患者104名を対象に、従来の血漿と比較した乾燥血液スポットを用いたグロボトリアオシルスフィンゴシン（LysoGb3）濃度測定の多施設共同評価

Multicenter evaluation of use of dried blood spot compared to conventional plasma in measurements of globotriaosylsphingosine (LysoGb3) concentration in 104 Fabry patients.

• Sabrina Malvagia
• Lorenzo Ferri
• Maria Della Bona
• Walter Borsini
• Calogero Lino Cirami
• Egrina Derwishi
• Sandro Feriozzi
• Serena Gasperini
• Serena Motta
• Renzo Mignani
• Barbara Trezzi
• Federico Pieruzzi
• Amelia Morrone
• Marta Daniotti
• Maria Alice Donati
• Giancarlo la Marca

抄録

目的:

ファブリー病は、X連鎖性のライソゾーム蓄積障害で、グロボトリアオシルセラミドやその脱離誘導体であるグロボトリアオシスフィンゴシン（LysoGb3）などの糖脂質を分解する酵素であるα-ガラクトシダーゼAの欠損が原因とされています。ここでは、古典型と晩発型の患者の乾燥血液スポット（DBS）と血漿中のLysoGb3の濃度を比較しました。

OBJECTIVES: Fabry disease (FD) is an X-linked lysosomal storage disorder, resulting from a deficiency of the enzyme α-galactosidase A, responsible for breaking down glycolipids such as globotriaosylceramide and its deacylated derivative, globotriaosylsphingosine (LysoGb3). Here, we compare the levels of LysoGb3 in dried blood spots (DBS) and plasma in patients with classic and late-onset phenotypes.

方法は以下の通りです。:

FD患者104名（男性39名、女性65名）を対象に、LysoGb3の測定を行いました。静脈血を採取した。一部を濾紙にスポットし、もう一部を分離して血漿を得た。DBSと血漿中のLysoGb3濃度は、高感度エレクトロスプレーイオン化液体クロマトグラフィー・タンデム質量分析法によって測定された。異なるマトリックス間の一致は、線形回帰とBland Altman分析を用いて評価した。

METHODS: LysoGb3 measurements were performed in 104 FD patients, 39 males and 65 females. Venous blood was collected. A portion was spotted onto filter paper and another portion separated to obtain plasma. The LysoGb3 concentrations in DBS and plasma were determined by highly sensitive electrospray ionization liquid chromatography tandem mass spectrometry. Agreement between different matrices was assessed using linear regression and Bland Altman analysis.

結果:

DBSの分析法は、精度、正確性、マトリックス効果、回収率、安定性を評価することで検証された。分析性能は，多数のFD患者（46バリアント）から得られた合計104のDBSと血漿のペアサンプルを比較することで検証された。血漿中のLysoGb3濃度とDBS中のLysoGb3濃度には、いくつかの例外を除き、強い相関関係が見られました。また、ヘマトクリット値が正常値よりも低い貧血患者では不一致が見られた。

RESULTS: The method on DBS was validated by evaluating its precision, accuracy, matrix effect, recovery, and stability. The analytical performances were verified by comparison of a total of 104 paired DBS and plasma samples from as many FD patients (representing 46 variants). There was a strong correlation between plasma and the corresponding DBS LysoGb3 concentrations, with few exceptions. Discrepancies were observed in anemic patients with typically low hematocrit levels compared to the normal range.

結論:

この方法はLysoGb3の迅速な分析に有効であることがわかった。DBSは、FD患者の診断、初期の表現型の割り当て、および治療モニタリングのためにLysoGb3レベルを測定する、便利で高感度かつ再現性のある方法である。

CONCLUSIONS: The method proved to be efficient for the rapid analysis of LysoGb3. DBS provides a convenient, sensitive, and reproducible method for measuring LysoGb3 levels for diagnosis, initial phenotypic assignment, and therapeutic monitoring in patients with FD.

© 2021 Walter de Gruyter GmbH, Berlin/Boston.