CircANXA2はmiRNA-133の発現阻害を介して心筋虚血再灌流障害における心筋のアポトーシスを促進する

CircANXA2 Promotes Myocardial Apoptosis in Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury via Inhibiting miRNA-133 Expression.

• Liang Zong
• Weixin Wang

抄録

目的:

本プロジェクトは、CircANXA2がmiR-133の発現を阻害することで心筋細胞のアポトーシスを促進し、心筋虚血・再灌流傷害の発症に関与するかどうかを検討することを目的としています。.定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（qRT-PCR）を用いて、低酸素/再酸素化（H/R）処理後のH9c2細胞におけるCircANXA2の発現レベルを検出した。H9c2細胞における心筋損傷マーカーの評価は、乳酸脱水素酵素（LDH）、マロナールアルデヒド（MDA）、スーパーオキシドジスムターゼ（SOD）、グルタチオン過酸化（GSH-PX）を含む市販のキットを用いて行った。心筋細胞の増殖およびアポトーシスの検出には、それぞれMTT分析およびフローサイトメトリーを用いた。アポトーシス関連遺伝子のタンパク質発現の検出にはウエスタンブロットを用いた。

Objective: This project is aimed at investigating whether CircANXA2 can promote the apoptosis of myocardial cells by inhibiting miR-133 expression and thereby participate in the development of myocardial ischemia-reperfusion injury. . Quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) was used to detect the expression level of CircANXA2 in H9c2 cells after hypoxia/reoxygenation (H/R) treatment. Evaluation of myocardial injury markers in H9c2 cells was performed using commercial kits, including lactate dehydrogenase (LDH), malonaldehyde (MDA), superoxide dismutase (SOD), and glutathione peroxidation (GSH-PX). MTT analysis and flow cytometry were used to detect myocardial cell proliferation and apoptosis, respectively. Western blot was used to detect the protein expression of apoptosis-related genes.

結果:

qRT-PCRの結果、コントロールと比較して、H/R処理したH9c2細胞ではCircANXA2の発現が上昇し、miR-133の発現レベルが有意に低下した。CircANXA2の過剰発現は、H/R処理したH9c2細胞において、LDH、MDA、SOD、GSH-PX活性を増加させた。同時に、CircANXA2過剰発現はH/R処理細胞の増殖を抑制し、CircANXA2は心筋細胞のアポトーシスを誘導することができた。ウェスタンブロットの結果、CircANXA2を過剰発現させると、プロアポトーシス遺伝子BaxとチトクロームCがアップレギュレーションされ、抗アポトーシス遺伝子Bcl-2がダウンレギュレーションされることが示された。H9c2 細胞では、miR-133 をアップレギュレーションすることで、CircANXA2 の過剰発現による増殖抑制を逆転させ、アポトーシスを増加させることが可能であることが示唆された。

Result: qRT-PCR results showed that compared with the control, the expression of CircANXA2 was upregulated and the expression level of miR-133 was significantly decreased in H/R-treated H9c2 cells. CircANXA2 overexpression increased LDH, MDA, SOD, and GSH-PX activity in H/R-treated H9c2 cells. At the same time, CircANXA2 overexpression inhibited the proliferation of H/R-treated cells, and CircANXA2 was able to induce cardiomyocyte apoptosis. Western blot results showed that after overexpression of CircANXA2, the proapoptotic genes Bax and cytochrome C was upregulated, while the antiapoptotic gene Bcl-2 was downregulated. In H9c2 cells, upregulating miR-133 can reverse the inhibition of proliferation induced by CircANXA2 overexpression and increase apoptosis.

結論:

CircANXA2はmiR-133の発現を阻害することで、心筋虚血再灌流傷害における心筋細胞のアポトーシスを促進する。CircANXA2は心筋虚血再灌流傷害の標的となる可能性がある。

Conclusions: CircANXA2 promotes cardiomyocyte apoptosis in myocardial ischemia-reperfusion injury by inhibiting the expression of miR-133. CircANXA2 may be a potential target for myocardial ischemia-reperfusion injury.

Copyright © 2020 Liang Zong and Weixin Wang.